背景[1-6]
Recombinant Murine CT-1（重组小鼠CT-1）是将小鼠CT-1与生物工程菌杂交后诱导表达的蛋白，实验中主要用于免疫组化和WB。CT-1是一种细胞因子。它是21.5kDa的心脏肥大因子和IL-6细胞因子家族的蛋白质成员。该蛋白质通过与糖蛋白130（gp130）/白血病抑制因子受体β（LIFR）异二聚体相互作用而发挥其细胞作用。
此外，CT-1激活心肌细胞中的磷脂酰肌醇3-激酶（PI-3激酶）并增强转录因子NF-κBDNA结合活性。CT-1在心脏，骨骼肌，前列腺和卵巢中高度表达，在肺，肾，胰腺，胸腺，睾丸和小肠中表达较低。CT-1与心脏病的病理生理学相关，包括高血压，心肌梗塞，心脏瓣膜病和充血性心力衰竭。糖蛋白130（也称为gp130，IL6ST，IL6-β或CD130）是跨膜蛋白，其是所有细胞因子受体类的创始成员。
它形成一个亚单位的的Ⅰ型细胞因子受体型的内IL-6受体家族。它经常被称为共同的gp130亚基，并且是用于重要信号转导以下细胞因子的接合。与其他I型细胞因子受体一样，gp130具有WSXWS氨基酸基序，可确保正确的蛋白质折叠和配体结合。它与Janus激酶相互作用，在受体与其配体相互作用后引发细胞内信号。在结构上，gp130由其细胞外部分中的五个纤连蛋白III型结构域和一个免疫球蛋白样C2型（免疫球蛋白样）结构域组成。
研究应用[7][8]
1.用于研究SOCS1介导CT-1对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的保护作用
方法用改良的方法培养出生1～3d的乳鼠心肌细胞,分为对照组:DMEM液培养6 h;缺氧复氧组;CT-1组:缺氧复氧+CT-1;ASODN组1:缺氧复氧+CT-1+ASODN(终浓度为20μmol/L);ASODN组2;SODN组:缺氧复氧+CT-1+SODN;ScODN组:缺氧复氧+CT-1+ScODN。测定心肌细胞的存活率、线粒体膜电位(Δψm)、细胞活性氧(ROS)、细胞凋亡率及SOCS1水平。结果缺氧复氧组较对照组心肌细胞凋亡率增加、ROS水平升高、心肌细胞存活率降低、Δψm下降,P均<0.05;而CT-1组较缺氧复氧组心肌细胞存活率上升、凋亡率减少、Δψm增加。SOCS1 ASODN干预后,心肌细胞凋亡率和ROS水平明显升高,Δψm水平下降。缺氧复氧组SOCS1 mRNA和蛋白较对照组有所增加;CT-1组SOCS1 mRNA和蛋白均较缺氧复氧组升高,SOCS1 ASODN干预后下降。结论SOCS1介导了CT-1减轻缺氧复氧引起的心肌细胞损伤。
2.用于研究吡格列酮对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞中CT-1的影响
方法:体外培养乳鼠心肌细胞,分组给药后,检测心肌细胞肥大的指标:心肌细胞的表面积(图像分析法)、蛋白含量(考马斯亮蓝法)、心房利钠因子(ANF)mRNA的表达(RT-PCR法);同时用半定量RT-PCR检测CT-1 mRNA的表达。结果:高糖高胰岛素组心肌细胞表面积、蛋白含量、ANFmRNA表达以及CT-1 mRNA水平均升高(P<0.01),而吡格列酮治疗组降低(P<0.05)。结论:高糖高胰岛素诱导的肥大心肌中CT-1表达上升,而吡格列酮能抑制其表达,推测CT-1可能参与了高糖高胰岛素所引起的心肌肥大的发生,而吡格列酮抑制心肌肥大的作用可能是通过抑制CT-1介导的。
参考文献
[1] "Recombinant human Cardiotrophin 1 protein(ab9838)".www.abcam.com.Retrieved 2017-08-09.
[2] Suppressor of cytokine signaling-1 regulates the sensitivity of pancreatic beta cells to tumor necrosis factor.MM Chong,HE Thomas,TW Kay.Journal of Biological Chemistry.2002
[3] The tyrosine 974 within the LIF-R-chain of the gp130/LIF-R heteromeric receptor complex mediates negative regulation of LIF signalling.Clahsen T,Lehmann U,Stross C,et al.Cellular Signalling.2005
[4] SOCS1/JAB likely mediates the protective effect of cardiotrophin-1 against lipopolysaccharide-induced left ventricular dysfunction in vivo.Tanimoto K,Saito Y,Hamanaka I,et al.J Circ.2005
[5] SOCS-1 participates in negative regulation of LPS responses.Nakagawa R,Naka T,Tsutsui H,et al.Immunity.2002
[6] New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury:targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase(RISK)-pathway.Hausenloy DJ,Yellon DM.Cardiovascular Research.2004
[7] 吡格列酮对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞中CT-1的影响[J].刘建军,李振中,鞠瑛,李永刚,邵峰,刘真,王怀经,邢子英.山东大学学报(医学版).2006(08)
[8] SOCS1介导CT-1对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的保护作用[J].李菊香,鲍慧慧,万磊,夏子荣,颜素娟,苏海,吴延庆,洪葵,吴清华,程晓曙.山东医药.2011(12)