BCA蛋白浓度测定试剂盒的应用

2020/3/11 7:53:35

背景及概述[1]

试剂盒是一种将测定一种成分所需要的2种或2种以上的试剂及实验室一般用品连同操作说明书包装在一起,形成商品化的试剂单位,即由厂家提供给用户使用的一种套装试剂,使用者除用自备的蒸馏水或试剂盒提供的缓冲液进行复溶试剂的操作外不需要作任何试剂配制。目前检测试剂已广泛采用这一方式提供,kit的应用不但节约人力减少配制误差,而且有利于试剂质量的保证和实验室间方法学的统一,提高了可比性。

BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCAProteinAssayKit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。BCA蛋白浓度测定试剂盒灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。在50-2000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的TritonX-100,5%的Tween20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇(DTT)低于1mMβ-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。

应用[2]

有研究考察活性保护剂对微球中蛋白活性的保护作用。以超氧化物歧化酶(SOD)为模型药,采用W/O/W复乳-溶剂挥发法制备SOD-PLGA微球,采用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定SOD蛋白浓度,黄嘌呤氧化酶系统测定SOD活性,考察多糖、多元醇、表面活性剂等活性保护剂对SOD活性的保护作用,并探讨保护剂之间是否有联合作用及保护剂含量对SOD活性保护作用的影响。结果活性保护剂对SOD活性均有保护作用。BSA和β环糊精有协同作用。在一定范围内,随着保护剂用量的增加,活性保护作用增强。结论BSA和β环糊精较好的保护了PLGA微球中SOD的活性。

主要参考资料

[1] 协和医学词典

[2] 活性保护剂对微球中蛋白活性的保护作用

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