如何配制1 M和1.5 M Tris-HCl缓冲液?

2024/10/18 9:48:26 作者:小满

Tris-HCl缓冲液是一种常用的生物化学缓冲剂,其有效 pH 范围通常在pH7.0-9.0之间。Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种应用广泛的有机物,化学式为C4H11NO3,白色结晶颗粒。1M Tris-HCl (pH8.8)溶液,可用于配制SDS-PAGE或native PAGE的上层胶,用于蛋白电泳分离。

TRIS-HCL缓冲溶液

配制1 M Tris-HCl缓冲液的方法如下:

称量121.1g Tris置于1L烧杯中。

加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

根据所需的pH值,按下表量加入浓盐酸进行调节:

pH 7.4:约70mL浓盐酸

pH 7.6:约60mL浓盐酸

pH 8.0:约42mL浓盐酸

将溶解定容至1L。

高温高压灭菌后,室温保存。

配制1.5 M Tris-HCl缓冲液的步骤如下:

称取181.7g Tris置于1L烧杯中。

加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

用浓盐酸调pH值至8.8。

将溶液定容至1L。

高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

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