Tris-HCl缓冲液是一种常用的生物化学缓冲剂,其有效 pH 范围通常在pH7.0-9.0之间。Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种应用广泛的有机物,化学式为C4H11NO3,白色结晶颗粒。1M Tris-HCl (pH8.8)溶液,可用于配制SDS-PAGE或native PAGE的上层胶,用于蛋白电泳分离。

配制1 M Tris-HCl缓冲液的方法如下:
称量121.1g Tris置于1L烧杯中。
加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
根据所需的pH值,按下表量加入浓盐酸进行调节:
pH 7.4:约70mL浓盐酸
pH 7.6:约60mL浓盐酸
pH 8.0:约42mL浓盐酸
将溶解定容至1L。
高温高压灭菌后,室温保存。
配制1.5 M Tris-HCl缓冲液的步骤如下:
称取181.7g Tris置于1L烧杯中。
加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
用浓盐酸调pH值至8.8。
将溶液定容至1L。
高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。