介绍
L-4-溴苯丙氨酸(4-Bromo-L-phenylalanine)是一种氨基酸衍生物,分子式为C9H10BrNO2,可溶于甲醇(轻微、超声处理)、水(轻微、加热、超声处理),它的外观白色至类白色固体,具有一定的吸湿性。它主要作为药物分子和有机合成中间体,常将其结构引入到生物活性分子中去。
图一 L-4-溴苯丙氨酸
合成
在30°C下配制100mM TRIS缓冲液(pH 8.5),其中含有5mM苯丙氨酸(rac-1a-s),在1mL反应体积中含有纯化PzaPAL或PcPAL(50 mg,任一种)的氨消除反应混合物。通过HPLC分析在不同时间点(17、40、64和168小时)从反应混合物中采集的样品(50 XL)的转化率和ee值。通过HPLC测量氨的添加和消除反应。在安捷伦1200HPLC仪器上,使用Phenomenex Gemini NX-C-18柱和NH4OH缓冲液(0.1 M,pH 8.5)和MeOH的混合物,以1 mL min-1的流速测定转化率。使用适当的响应因子从峰面积积分计算转化率。在Agilent 1100 HPLC仪器上使用Crownpak CR-I(+)柱和pH为1.5的HClO4水溶液和乙腈的混合物作为洗脱剂,以0.4 mL min-1的流速进行对映体分离[1]。
图二 L-4-溴苯丙氨酸的合成
向Brp溶液中,将3.3 g L-苯丙氨酸(20mmol)溶解在32 mL 60%硫酸溶液中,然后将其放入50 mL圆底烧瓶中混合,向烧瓶中加入6.24 g BICA-Na(22 mmol),在150 mL冰水中搅拌2分钟,在冰浴条件下继续混合,然后加入氢氧化钡水溶液至pH 6。在该过程中,反应混合物中出现白色沉淀。用布氏漏斗过滤并用水清洗沉淀物后,收集滤液和洗涤剂,用旋转薄膜蒸发器浓缩至30mL。用梯度C18(ODS)反相色谱柱洗脱,从水:甲醇的组成比为5:1降至1:5。然后收集产物,在35°C的真空旋转蒸发器中蒸馏去除流动相。最终,我们得到3.1g白色固体产物,收率为75%[2]。
图三 L-4-溴苯丙氨酸的合成2
参考文献
[1]Varga A ,Csuka P ,Sonesouphap O , et al.A novel phenylalanine ammonia-lyase from Pseudozyma antarctica for stereoselective biotransformations of unnatural amino acids[J].Catalysis Today,2020,366185-194.
[2]Zhao Q ,Xu T ,Li M , et al.Synthesis of Six Phenylalanine Derivatives and their Cell Toxicity Effect on Human Colon Cancer Cell Line HT-29[J].Letters in Drug Design & Discovery,2015,12(6):466-470.