背景及概述[1]
海帕刺桐碱（Hypaphorine）又叫下箴刺桐碱，研究结果显示，海帕刺桐碱能明显抑制小鼠耳廓肿胀，减少小鼠耳廓重量；增加小鼠胸腺、脾脏重量，提高小鼠血清溶血素水平；明显降低CCL4和异硫氰酸萘酯所致肝损伤小鼠血清中转氨酶活性及胆红素含量，保护肝损伤。小叶锦鸡儿为蔷薇目豆科的植物，果实、花、根入中药，中药果实：味苦，性寒。清热解毒。
花：味甘，性平。养血安神。根：味甘、微辛，性微温。祛风止痛，祛痰止咳。海帕刺桐碱的制备方法多采用硅胶柱、凝胶柱和制备液相方法分离。如文献“微波辅助提取 高效液相色谱分析制备鸡骨草中相思子碱和下箴刺桐碱的研究”。但是，固体填充柱分离存在收率低、产出小、操作复杂，溶剂用量大、污染严重等缺点。
结构
应用[2]
有研究探讨海帕刺桐碱的药理作用。采用小鼠耳廓肿胀法、免疫器官重量和溶血素生成方法，四氯化碳(CCl4)和异硫氰酸萘酯制备肝损伤模型；观察海帕刺桐碱抗炎、免疫增强和抗肝损伤作用。
研究结果显示，海帕刺桐碱能明显抑制小鼠耳廓肿胀，减少小鼠耳廓重量；增加小鼠胸腺、脾脏重量，提高小鼠血清溶血素水平；明显降低CCl4和异硫氰酸萘酯所致肝损伤小鼠血清中转氨酶活性及胆红素含量，保护肝损伤。提示海帕刺桐碱具有明显的抗炎、免疫增强和降酶退黄、抗肝损伤作用，推测海帕刺桐碱可能是鸡骨草抗肝炎的有效成分之一，为临床抗肝炎的应用和制剂开发提供了实验依据。
制备[3-4]
方法1：王不留行刺桐碱的制备工艺：王不留行种子经粉碎，4倍石油醚常温脱脂24h，晾干。用10倍量75％乙醇溶液，85℃回流提取2次，每次2h。过滤去渣，合并滤液，减压浓缩至无乙醇，去离子水复溶。再依次用二氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇等体积各萃取4次，得到的水饱和正丁醇萃取相，减压浓缩至干，去离子水复溶，真空干燥得干粉，备用。
将水饱和正丁醇萃取物干粉用90％甲醇水溶液溶解，配制成浓度为20mg/mL的样品溶液，毛细管点样，硅胶GF254板的载样量为15mg。展开剂为正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5(上层)，将点完样品的硅胶板放入已饱和的层析缸中，密闭，待展开距离至16cm，取出硅胶板，晾干。将硅胶板置于紫外灯254nm下检视，根据观察到的暗斑，将其分为七个部分，分别刮板收集，再用甲醇提取出各组分，减压浓缩至干，去离子水复溶，真空干燥得干粉，备用。
将第2部分的干粉按以下制备液相色谱条件分离并收集保留时间为23.593min的峰。柱子：WatersSunFireTMPrepCl8OBDTM(19×150mm，5μm)；流速：4mL/min；柱温：30℃；检测波长：220nm；流动相：甲醇(A)-水(B)；梯度洗脱：0-10min，20％A；10-20min，20％-40％A；20-25min，40％A；25-35min，40％-100％A；35-45min，100％A；进样量：5mg。将保留时间为23.593min的峰的样品收集溶液减压浓缩至干，超纯水复溶，真空干燥得干粉，备用。
方法2：一种高纯度海帕刺桐碱的制备方法，其特征在于以下步骤：I小叶锦鸡儿原料粉碎，加酸性水浸泡提取2～3次，提取液超滤膜超滤后再用纳滤膜浓缩，浓缩液加乙醇溶液沉淀，得沉淀物；II上述沉淀物采用采用高速逆流色谱分离，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压干燥得海帕刺桐碱。步骤I中所述的超滤膜可选截留分子量10000～2000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量200～100的中空纤维素膜。步骤II中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选氯仿、甲醇、水组合，比例为3～10：3～5：4～9，上相为下定相，上相为流动相。
含量测定[5]
一种基于荧光定量法的下箴刺桐碱浓度测量方法，包含如下步骤：配制色氨酸标溶液，绘制色氨酸标准曲线；配制色氨酸与下箴刺桐碱混合标准溶液，测定标准混合溶液的荧光强度，绘制标准混合溶液的标准曲线；计算混合标准溶液中色氨酸质量浓度，线性关系曲线1的绘制，线性关系曲线2的绘制，推导下箴刺桐碱的浓度的计算公式，确定下箴刺桐碱溶液浓度，该方法能在色氨酸杂质存在条件下直接用荧光光谱法定量下箴刺桐碱的荧光量，避免色氨酸杂质对测试结果的影响，本法前处理时间短、检测成本低、能快速大批量检测。
主要参考资料
[1] CN201210382480.3一种高纯度海帕刺桐碱的制备方法
[2] 海帕刺桐碱药理作用的研究
[3] CN201210382480.3一种高纯度海帕刺桐碱的制备方法
[4] CN201410195553.7一种王不留行刺桐碱单体的制备方法
[5] CN201510779510.8一种基于荧光定量法的下箴刺桐碱浓度测量方法