氯化四唑蓝是还原糖的灵敏试剂，可在加热的碱性溶液中与还原糖反应，生成不溶性的三苯福尔马散红色沉淀，2-脱氧D-葡萄糖虽也属还原糖，但还原性显著减弱。我们试用四唑蓝比色法对2-脱氧-D-葡萄糖进行了微量测定。改进了操作步骤，提高了灵敏度，而且数据稳定，重现性好。
实验方法
(一)试剂
1、氯化四唑蓝贮备溶液：1%乙醇溶液，保存于冰箱中。
2、氯化四唑蓝试剂：贮备液一份与三倍量的0.3M NaOH溶液在临用时混合。
3、混合溶剂:氯仿-乙醇(5:4)
4、2-脫氧-D-葡萄糖标准溶液:80pg/m1.
(二)操作步骤
从80ug/mI的标准溶液分别取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置于带磨口塞的试管中，依次各加水0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.0ml。在毎支试管中各加入氯化四唑蓝试剂0.5ml。混匀后放入104℃的盐水浴中加热5分钟，立即在冷水中冷却。然后将试管中的沉淀物用少量混合溶剂溶解，转移到25ml的容量瓶中，并稀释到刻度。用1cm的比色皿在485nm处测吸光度。其吸光度与浓度之间的关系曲线见图，样品测定参照上述操作步骤进行。
结论
Readsveld等曾用氯化四唑蓝比色法测定葡萄糖、甘露糖和麦芽糖。将分析试祥与试剂混合物置于试管中，在小火上直接加热生成红色沉淀，用溶剂溶解，在615nm有最大吸收。我们改用水浴加热较用小火直接加热易于控制，且重复性好。所形成的有色络合物的最大吸光度不在615nm处，而是485nm。表明加热温度不同，有色络合物的结构也有差异。用水浴加热时，加热温度和时间都会影响颤色强度。另外，有色溶液的稀释体积也要适当。体积太小(如10ml)，溶液形成半透明的乳浊液，稀释到50ml(Readsveld法)，则灵敏度降低一倍。实验结果证明稀释到25ml较为适中。
参考文献
[1]刘景芝,赵夏令.氯化四唑蓝比色法测定微量2-脱氧-D-葡萄糖[J].分析化学,1983,(03):196+226.