极超敏ECL化学发光即用型底物

2020/3/13 8:57:40

背景及概述[1]

极超敏ECL化学发光即用型底物是一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒,发光效果显著优于特超敏ECL化学发光即用型底物,可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。极超敏ECL化学发光即用型底物的发光强度高。

20微升25pg/μl辣根过氧化物酶标记IgG中,加入100微升联迈生物的极超敏ECL化学发光即用型底物工作液等三种不同的发光液后,在不同时间点通过化学发光仪(luminometer)检测化学发光。检测数据显示在1小时内极超敏ECL化学发光即用型底物的发光效果总是最强的,特超敏ECL化学发光试剂盒和持久性化学发光底物的发光比较稳定,但发光强度要弱不少。

极超敏ECL化学发光即用型底物的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量,以免获得过深的难以比较灰度的条带。极超敏ECL化学发光即用型底物非常稳定。37℃水浴孵育30天,和4℃保存的试剂相比,对相同样品的检测效果无任何明显差异。极超敏ECL化学发光即用型底物的背景很低,对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。

注意事项[2]

极超敏ECL化学发光即用型底物A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。特别是B液,含有氧化剂,比较容易被还原而失效。极超敏ECL化学发光即用型底物的萤光持续时间很长,但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些,随后萤光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片或成像。

当发现极超敏ECL化学发光即用型底物的检测灵敏度过高而影响检测效果时,可以选择检测灵敏度较低一些的其他底物,或者减少样品、一抗或二抗的用量。极超敏ECL化学发光即用型底物A液和B液均对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

主要参考资料

[1] 极超敏ECL化学发光试剂盒说明书

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