禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法)的应用

2025/8/20 9:27:44 作者:云霄

背景[1]

禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法)适用于禽流感病毒H5亚型检测,可用于临床禽流感感病毒H5亚型感染的辅助诊断,但不作确诊使用。


禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法).png

禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法)

储存条件及有效期:避光-20℃以下保存,避免反复冻融,有效期12个月。

适用仪器:ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。

应用[2]

禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法)可以用于表达不同分支H5及H7禽流感病毒HA基因重组鸭瘟病毒疫苗株的构建和评价

禽流感(Avian influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的一种感染和疾病综合征。AIV是一种重要的人兽共患病病原,宿主广泛,主要感染禽类,部分亚型AIV可感染人类等哺乳动物。水禽是AIV的自然储存宿主,可携带多种亚型AIV,且不发病。水禽是我国AIV有效防控关键风险点,鸭作为水禽中最主要的种类,占水禽种类的绝大多数,分布广泛。

以鸭瘟病毒,即鸭病毒性肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)疫苗株为载体,利用该毒株US7和US8基因之间的复制非必需区,插入2.3.4分支代表性毒株A/duck/Anhui/1/2006(H5N1)株病毒HA基因表达框架,构建和研制了禽流感重组鸭瘟疫苗。该疫苗已获得一类新兽药证书,按照鸭瘟弱毒疫苗免疫程序接种鸭,可诱导对H5亚型禽流感和鸭瘟持续完全保护。为进一步研制与当前我国家禽中监测到的AIV抗原匹配性更加良好的禽流感重组鸭瘟疫苗开展本研究。本研究共包括三部分,一是分别构建并鉴定了表达2.3.4.4h分支H5亚型和H7N9亚型病毒HA基因的重组病毒rDEV-13和rDEV H7-4;二是进一步评价实验室前期构建的表达2.3.4.4b分支H5亚型HA基因的rDEV-14对当前流行AIV毒株的免疫效力研究,并进行了rDEV-13和rDEV-14混合使用免疫效力研究;三是开展了rDEV-13、rDEV-14和rDEV H7-4三价混合免疫效力评价研究。本研究利用实验室前期建立的鸭瘟病毒多片段拯救系统,将H5亚型2.3.4.4h分支的代表毒株A/duck/Fujian/S1424/2020(H5N6)(DK/FJ/S1424/20)和H7亚型A/chicken/Yunnan/SD024/2021(H7N9)(CK/YN/SD024/21)的HA基因分别插入US7~US8之间,拯救出重组病毒rDEV-13和rDEV H7-4。用禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法)、间接免疫荧光(IFA)以及Western blot等试验进行系列体外试验鉴定。禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸试剂盒(荧光-PCR法)结果显示,第5、10、15代的rDEV-13和rDEV H7-4基因中均可检测到HA基因表达框的存在。

参考文献

[1]R禽流感的诊断与防制.2002年第12期《畜禽业》

[2]张小雨.表达不同分支H5及H7禽流感病毒HA基因重组鸭瘟病毒疫苗株的构建和评价[D].中国农业科学院,2024.

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