背景[1-3]
绵羊痘病毒(SPPV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)适用于检测绵羊痘病毒(SPPV)的DNA，用于绵羊痘病毒(SPPV)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。本产品不提供活体样品做阳性对照，仅提供人工合成的特异性DNA片段标准品作为阳性对照，仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗用途。
绵羊痘病毒(SPPV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)
技术原理
绵羊痘病毒(SPPV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)采用TaqMan一步法荧光定量PCR技术，结合特异性扩增引物对目的基因进行体外扩增，本试剂盒具有灵敏性高、特异性强、反应时间短等优点，操作简便，污染概率低等特点。
产品特点
特异性好：采用TaqMan荧光探针法进行扩增。灵敏度高：检测灵敏度可达500copies/uL以下。操作简便：采用一步法荧光定量PCR进行扩增，逆转录步骤与PCR扩增在一管反应液中完成。
适用仪器
ABI、安捷伦、Roche、博日，朗基，柏恒等梯度PCR仪。自备：无DNA/RNA酶的1.5mL离心管，0.2mL PCR反应管，滤芯吸头(规格:10μL，200μL，1000μL)，离心机，振荡混合器，各种规格的移液器。
应用[4][5]
绵羊痘病毒(SPPV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)可以用于绵羊痘病毒甘肃株的分离鉴定及双重PCR检测方法的初步建立
研究进行了以下几个方面的工作：1、绵羊痘病毒甘肃株的分离鉴定从甘肃张掖市发病羊采集病料,采用羔羊睾丸细胞分离到一株SPPV,通过扩增SPPV特异性很强的P32基因,以及对P32基因的序列分析,从绵羊痘病毒(SPPV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)分子水平鉴定该毒株为SPPV,命名为GansuZY-isolate。2、绵羊痘病毒甘肃株P32,GPCR,RPO30基因的克隆与序列分析克隆了GansuZY-isolate株的P32,GPCR和RP030基因。序列分析表明,该毒株的这三个基因与其他SPPV的相似性均在99.0%-100%之间,说明这三个基因在SPPV不同毒株之间具有高度的保守性。进化分析表明,这3个基因均在SPPV的分支里面,与中国其他地方报道的SPPV株在进化上比较接近,说明目前我国SPPV的流行毒株比较稳定,没有发生大的基因变异。3、羊痘病毒双重PCR检测方法的建立初步建立了P32与InS-1,GPCR与InS-1,RPO30与InS-1的双重PCR检测方法。结果表明,三种方法均具有良好的特异性；敏感性试验表明,P32与InS-1基因、GPCR与InS-1基因双重PCR反应的灵敏度为652ng;RPO30与InS-1基因双重PCR反应的灵敏度为65.2ng。
参考文献
[1]TaqMan based real-time duplex PCR for simultaneous detection and quantitation of capripox and orf virus genomes in clinical samples[J].G.Venkatesan;;V.Balamurugan;;V.Bhanuprakash.Journal of Virological Methods.2014
[2]Multiplex PCR for simultaneous detection and differentiation of sheeppox,goatpox and orf viruses from clinical samples of sheep and goats[J].G.Venkatesan;;V.Balamurugan;;V.Bhanuprakash.Journal of Virological Methods.2014
[3]Pathology and Viral Antigen Distribution following Experimental Infection of Sheep and Goats with Capripoxvirus[J].C.Embury-Hyatt;;S.Babiuk;;L.Manning;;S.Ganske;;T.R.Bowden;;D.B.Boyle;;J.Copps.Journal of Comparative Pathology,2011(2-3)
[4]Pox outbreaks in Sheep and Goats at Makhdoom(Uttar Pradesh),India:Evidence of Sheeppox Virus Infection in Goats[J].V.Bhanuprakash;G.Venkatesan;V.Balamurugan;M.Hosamani;R.Yogisharadhya;R.S.Chauhan;A.Pande;B.Mondal;R.K.Singh.Transboundary and Emerging Diseases,2010(5)
[5]苏海龙.绵羊痘病毒甘肃株的分离鉴定及双重PCR检测方法的初步建立[D].西北民族大学,2014.