SDS-PAGE凝胶制备试剂盒在使用过程中有哪些常见问题?

2025/8/21 9:26:43 作者:小满

1、SDS-PAGE凝胶制备试剂盒为什么上层胶和下层胶分界面不平齐?

上层胶溶液加入下层胶的时候冲击力太大,容易造成上、下层胶分界线不平整。建议灌注上层胶时使用1mL移液器,尽量不要垂直灌入,将灌胶枪头水平放置缓慢注入凝胶液,可获得平齐的界面。

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

2、拔梳子后泳道出现胶丝?

TEMED 用量过多会导致胶凝固过快,拔出梳子后泳道会出现胶丝。建议按照说明书要求添加TEMED,如有需要可以适当减少TEMED 用量。

3、蛋白marker从浓缩胶就开始分离了?

蛋白marker从浓缩胶开始分离为正常现象,本产品制备出的凝胶其上层胶具有一定的压缩能力,不过浓缩效果与传统SDS-PAGE凝胶有区别,与预制胶类似。但与传统PAGE胶相比,对蛋白条带分离效果更好,小分子量蛋白也可以清晰地分离开,且蛋白条带更窄更锐利。

4、胶制好后,可在4℃存放多久?

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒制备好的凝胶可在4℃保存1-2周,为确保较好的电泳效果,请尽量现配现用。推荐保存方法:制胶后,连同梳子置于自封袋中,加少量电泳缓冲液保持胶板湿润,密封后置于4℃保存。

5、为什么我制的胶凝固很慢?

凝胶时间跟温度和促凝剂用量的关系很大,实验室温度较低或者促凝剂加的不够会导致凝胶时间慢。若需缩短凝胶时间,可适当提高促凝剂的用量(在说明书用量的基础上增加5%-10%)或者补加TEMED,以加快凝胶速度。

6、制备好的凝胶中有气泡?

在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成。

7、可以进行非变性蛋白电泳吗?

可以用于非变性蛋白电泳,产品不含SDS,可以用于非变性凝胶电泳。

8、带颜色的组分为什么会有沉淀?

由于该组分中染料的特殊理化性质,长期静置会有部分沉淀析出,属于正常现象,使用前摇匀即可。

9、灌胶之后等待很久胶不凝固?

可能是促凝剂失效,促凝剂对温度较敏感,一定要低温保存。促凝剂在4℃可存放3个月,性能稳定。长期储存放-20°C。

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