RNase抑制剂的分类与应用

2025/8/21 14:36:34 作者:帝企鹅

RNA酶抑制剂是在大肠杆菌表达系统中重组表达的 RNase 抑制剂,可特异性抑制 RNase A、B、C 三种酶的活性。

RNA酶抑制剂,即核糖核酸酶(RNase)抑制剂, 是在大肠杆菌表达系统中重组表达的鼠源 RNase 抑制剂,分子大小为 50 kDa,能与 RNase 以非共价键的形式结合从而使 RNase 失活。通过非竞争性方式与 RNase A、B、C 特异性结合,从而抑制这三种酶的活性;当加入尿素或巯基类试剂时,抑制剂失活,RNase A、B、C 复性。但有的产品不能抑制 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 或来源于曲霉属的RNase,且当与 Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MLV 逆转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶(SP6,T7 或 T3)共同使用时对聚合酶活性无抑制作用。

RNase抑制剂

RNase分类

(一)核糖核酸酶A

核糖核酸酶A(RNase A)来源于牛胰脏,是一种内切核糖核酸酶,可特异攻击RNA上嘧啶残基的3’端,切割胞嘧啶或尿嘧啶与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键,反应终产物是3’嘧啶核苷酸和末端带3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。

(二)核糖核酸酶T1

核糖核酸酶T1(RNase T1)来源于米曲霉(Aspergillus orjzae),它特异地作用于鸟嘌呤3’端磷酸,切割位点在鸟嘌呤的3’磷酸和相邻核苷酸的5‘羟基之问的磷酸二酯键,反应终产物为3’鸟苷酸和末端带3’鸟苷酸的寡核苷酸片段。

(三)核糖核酸酶H

核糖核酸酶H(RNase H)最早是从小牛胸腺组织中发现的,其编码基因已被克隆到大肠杆菌中。它能特异地降解DNA:RNA杂交双链中的RNA链,产生具有3’一OH和5’一磷酸末端的寡核苷酸和单核苷酸,它不能降解单链或双链的DNA或RNA。

应用特点

1. cDNA合成

2. RT-PCR

3. 体外转录/翻译

4. 酶切 RNA 标记反应

5. 其他需要 RNA 完整性的应用

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