2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸，别名3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸，英文缩写TBHBA。它是一种高灵敏度替代酶法测定中Trinder反应中苯酚的理想色原剂。熔点为145℃~149℃(文献)，白色至奶油色结晶或粉末，不溶于水。主要做生化研究中的酶比色测定，TBHBA尿酸被尿酸酶在尿囊素氧化，产生的过氧化氢和4-氨基安替比林和2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸反应生成Chinonimine。
合成方法[1]
1、2,4,6-三溴-3-氨基苯甲酸(a)的合成
在250mL圆底烧瓶中放置13.7g(0.10mol)间氨基苯甲酸，加入60mL无水乙醚溶解。磁力搅拌下，用恒压滴液漏斗逐渐滴入58.7g溴水溶液(相当于含溴分组0.33mol)于圆底烧瓶中，约20min加完。所形成的白色糊状物(其实是白色沉淀)继续搅拌10min。然后在通风橱内慢慢转移到盛有250mL的烧杯中，加入150mL蒸馏水，搅拌5min，静止30min直至沉淀完全沉下。将混合物常温抽滤，所得到的固体用冷蒸馏水洗涤三次，烘干粗产物，保留约37.3g粗产物。将粗产物溶于无水乙醚中，加热溶液，然后萃取，得到37.0g 2,4,6-三溴-3-氨基苯甲酸晶体，收率98.9%，m.p.112℃~114℃,含量99.6%(GC)。
2、2,4,6-三溴苯甲酸重氨硫酸盐(b)的合成
在250ml烧杯中加人上步反应得到的37.0g 2,4,6-三溴-3-氨基苯甲酸晶体和50ml 0.2mol/L氢氧化钠溶液，温热搅拌使晶体充分溶解，用冷盐浴冷却至10~15℃。另在烧杯中配制35%的亚硝酸钠溶液(8.8g亚硝酸钠和16.3ml蒸馏水，充分溶解)。将此配制液也加入盛有2,4,6-三溴-3-氨基苯甲酸溶液的烧杯中。维持温度10C~15℃，在搅拌下，慢慢用滴管滴入35ml浓硫酸和70mI蒸馏水配制成的硫酸溶液(维持温度10°C~15℃)，直至用淀粉-碘化钾试纸检测呈现蓝色为止，继续在冷盐浴中放置20分钟，使反应完全，反应完毕时介质控制pH值为2.5左右，这时往往有白色细小晶体析出。抽滤，所得到的固体用冷蒸馏水洗涤三次，烘干粗产物，保留约38.7g粗产物。将粗产物经甲苯萃取、减压燕馏后得38.5g纯品2,4,6-三溴苯甲酸重氨硫酸盐，收率99.0%,m.p.120℃~124℃,含量99.7%(GC)。
3、2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(c)的合成
将上步合成的38.5g重氨硫酸盐加适量水稀释，即2,4,6-三溴苯甲酸重氨硫酸盐溶液。在装有搅拌器、温度计、滴液漏斗和冷凝器的500mL四口烧瓶中加入一定量的水、浓硫酸(实验中硫酸浓度控制在45%)水浴加热至80℃后滴加上述制备的重氨盐溶液进行水解。滴加毕后继续反应40min，使反应完全。将溶液在冷盐水中冷却，有白色晶体析出，抽滤，所得到的固体用冷蒸馏水洗涤三次，烘干粗产物，保留约36.8g2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸粗产物。将粗产物经甲苯萃取、减压蒸馏后得36.5g纯品2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸，收率99.3%(总体收率97.3%),m.p.143℃~146℃。
参考文献
[1]周石洋,陈玲. 2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸的合成[J]. 化工中间体,2012,9(7):36-39. DOI:10.3969/j.issn.1672-8114.2012.07.009.