5-羟色胺（5-hydrotryptamine, 5-HT）是一种重要的神经递质，影响人类包括睡眠、饥饿、情绪和攻击性在内的神经过程，其水平直接关系到个体的神经活动兴奋度。5-HT是一种分布广泛的单胺类物质，由肠道嗜铬细胞以及神经系统摄取的色氨酸或胺前体合成，在发挥完生理作用后必须灭活，以免产生中毒反应及5-HT受体的脱敏。人5-羟色胺转运蛋白(SERT)是一种膜蛋白，是介导细胞外5-羟色胺重摄取的重要蛋白，广泛分布于肠上皮细胞、中枢和外周的神经元以及血小板。高亲和力的SERT对5-HT的清除十分重要，是维持中枢和肠道突触间5-HT稳态环境的重要物质[1]。今年来研究发现人5-羟色胺转运蛋白(SERT)是治疗抑郁症、焦虑症、强迫症和肠易激综合征的重要靶点。2016年4月7日，《自然》杂志论文《人5-羟色胺转运体蛋白的X射线结构和作用机制》（X-ray structures and mechanism of the human serotonin transporter）首次报道了人5-羟色胺转运蛋白(SERT)的分子结构，分辨率高达3.15埃。且研究人员首次看到两种临床常用的抗抑郁症药物S-西酞普兰和帕罗西汀都能竞争性地结合在SERT蛋白的活性中心底物结合位点上，直接阻断5-羟色胺与SERT的结合，抑制了SERT的活性[2]。
图1 结合抗抑郁药物S-西酞普兰（a）和帕罗西汀（b）的人5-羟色胺转运体蛋白（SERT）
作用及操作步骤
人5-羟基色胺转运蛋白 (SERT) ELISA 试剂盒专为精确测定人体样本（例如血清、血浆和细胞培养上清液）中的5-羟基色胺转运蛋白水平而设计。ELISA试剂盒灵敏度高、特异性强，可确保结果准确且可重复，是各种应用研究的良好工具。如研究5-羟基色胺转运蛋白 (SERT)浓度与相关疾病发展的关系，开发治疗方法和生物标志物等。
人5-羟基色胺转运蛋白 (SERT) ELISA 试剂盒一般采用双抗体夹心法，使用分为六个步骤，分别为样本处理、加样、孵育、洗板、绘制标准曲线、分析结果读数。样本要求应清晰透明并离心除去沉淀物或悬浮物质，在-20oC或-80oC保存的样本应在1-6个月内完成检测，而在4oC保存的样本请在一周内完成检测，不同样本类型采用不同的预处理方法。ELISA实验中一般需要4次加样，即加样本、加检测抗体、加底物和加终止液。使用微量加样器斜45度加样，防止液体飞溅。ELISA试剂盒有两次孵育的过程，即加样本和加酶结合物两次抗原抗体反应的过程，这一过程需要一定的温度和时间。孵育过程是ELISA测定中最容易出现问题的步骤，温育时间不够可能影响检测下限，一般有温箱法、微波辐射法和水浴法等，研究人员可按照试剂盒使用说明书进行。洗板步骤降低未结合的抗体所引起的背景信号，从而增加分析的信噪比，有人工洗板和洗板机洗板。ELISA标准曲线的绘制一般采用四参数逻辑拟合（4PL）或五参数逻辑拟合（5PL），有些试剂盒公司会提供自动分析模版或软件。
参考文献
【1】孙程程，谢鹏雁等. 内脏高敏感大鼠结肠5-羟色胺转运体蛋白的表达, 世界华人消化杂志, 2010, 18(14): 1428-1433.
【2】JA Coleman, E Gouaux, etc. X-ray structures and mechanism of the human serotonin transporter, Nature, 2016, 532, 334-339.