人CD83(CD83)ELISA检测试剂盒的检测原理

2025/9/8 9:43:05 作者:电离式

简介

人CD83(CD83)ELISA检测试剂盒主要成分是CD83分子,CD83是一种由CD83基因编码的蛋白,CD83的膜结合形式由一个细胞外的V型免疫球蛋白样结构域、一个跨膜结构域和一个细胞质信号尾部组成,游离的可溶性形式仅由免疫球蛋白样结构域组成,膜结合的CD83预计会形成三聚体。可溶性的CD83能够组装成十二进制的复合物,CD83基因位于人类6p23染色体和小鼠13号染色体上,上游261bp的启动子由5个NF-κB和3个干扰素调节因子结合位点组成,反映了CD83在炎症中的参与,同时还有芳烃受体的结合位点,后者也出现在下游185bp的增强子序列中,位于第二个内含子内,并可能表明转录受到肠道内产生的微生物代谢物的负向调节。

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人CD83(CD83)ELISA检测试剂盒

检测原理

人CD83(CD83)ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物CD83,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中CD83的浓度。

应用

人CD83(CD83)ELISA检测试剂盒中CD83表达于参与GVHD发病机制的同种异体活化常规T细胞(allo-activatedTconv)和促炎树突状细胞(pro-inflammatoryDCs),同时也在急性髓系白血病(AML)细胞系(K562、Thp-1、U937、MOLM-13)表面表达;含CD3ζ信号域与41BB共刺激域的第二代CD83CAR在人T细胞中的转导效率约为60%,且CD83CART细胞与CD83+靶细胞共培养时可产生大量IFN-γ和IL-2,展现出强劲的杀伤活性与增殖能力;CD83CART细胞能有效抑制同种异体T细胞增殖,且可在48小时内高效清除CD83+Tconv和促炎DCs;体内异种GVHD模型中,CD83CART细胞被小鼠良好耐受,不仅显著提升小鼠生存率、减轻肺和肝等靶器官的GVHD损伤,还能降低CD1c+CD83+DCs、CD4+CD83+T细胞及致病性Th1细胞数量,并升高调节性T细胞(Treg)与allo-activatedTconv的比例;此外,CD83CART细胞可有效杀伤AML细胞系,对正常造血干细胞无明显脱靶毒性[1]。

参考文献

[1]Bishwas S ,Kelly W ,Jordan R , et al.Human CD83 Targeted Chimeric Antigen Receptor T Cell for the Prevention of Graft Versus Host Disease and Treatment of Myeloid Leukemia[J].Blood,2019,134(Supplement_1):196-196.

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