概述
D-正亮氨酸别名D-2-氨基己酸，是正亮氨酸的D型构型物质，其分子式为C6H13NO2，分子量为133.1655。常温常压下，D-正亮氨酸表现为白色有光泽的叶片状结晶，味苦，可溶于水和盐酸。实验测得，该化合物在受热至275～280℃会发生部分升华，当温度达到熔点301℃时，会发生部分分解。
应用
除了在生化研究领域的应用，D-正亮氨酸等氨基酸物质还被用于分析检测，例如，文献报道了一种反相-HPLC法测定食品中γ-氨基丁酸(GABA)的测定方法。具体地，用D-正亮氨酸混合消旋体——正亮氨酸作为内标物，样品中的γ-氨基丁酸和正亮氨酸与2,4-二硝基氟苯(FDNB)反应转化成稳定的衍生物并用乙醚萃取，挥发后，残余物溶解在NaOH溶液中，处理液注入反相-HPLC中，用甲醇溶液在盐酸缓冲液中线性梯度洗脱，于400 nm处检测。结果，GABA，正亮氨酸分别和FDNB反应60 min后达到平衡，流出液检测峰位分别在45 min和60 min。GABA在1 ng/ml～100 ng/ml范围内具有良好的线性。其相关系数大于0.999，检出限为1 ng/ml，实际样品加标回收率为98.4±2.3%。该方法简单，准确，用于实际样品检测，结果满意[1]。
合成探究
氨基酸作为一种常见的手性化合物，广泛应用于医疗，食品，保健品及饲料等与人类生活和健康密切相关的几大行业。其中，D-氨基酸作为医药及食品领域的重要原料，被广泛应用于半合成抗生素，多肽激素，杀虫剂和甜味剂等生产。一般而言，氨基酸的生产方法有发酵法，化学合成法和生物酶法合成。酶法合成与普通化学合成相比，具有高效，环保，安全和适合大规模生产等优点。研究构建了大肠杆菌工程菌，进行了一系列天然及非天然的氨基酸的酶法合成研究：重组表达了D型酰胺水解酶(D-stereospecific amino-acid amidase,DaaA)，该酶具有广泛的底物特异性，可以DL-氨基酰胺为底物光学拆分获得D-氨基酸。此外，以2-溴脂肪酸酰胺为原料化学生物法制备D-2-氨基脂肪酸，可拆分得到D-2-氨基丁酸，D-正缬氨酸和D-正亮氨酸，其比旋光均符合国际标准[2]。
有关研究
研究人员构建重组菌株E.coliBL21(DE3)转pET23a-tyrB，IPTG诱导其大量表达，依次通过盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析获得纯酶，运用薄层层析技术(TLC)检测。结果表明：纯化的TyrAT转氨酶对自身底物酪氨酸在37℃和50℃具有较高活性。分别加入非天然氨基酸L-正缬氨酸、L-新戊基甘氨酸、L-叔亮氨酸、D-正亮氨酸作为底物，检测到TyrAT转氨酶对L-叔亮氨酸在50℃下有活性，对D-正亮氨酸在37℃和50℃均有催化活性，且50℃下效果更好[3]。
参考文献
[1]李遂勤,王立忠,彭海成.反相高效液相色谱法测定食品中γ-氨基丁酸的研究[J].中国卫生检验杂志, 2011, 21(9):3.DOI:CNKI:SUN:ZWJZ.0.2011-09-023.
[2]王治元.生物酶法制备手性氨基酸及其衍生物研究[D].南京大学,2013.DOI:CNKI:CDMD:1.1016.003608.
[3]陈茹,王行国,何婷,等.E.coli酪氨酸转氨酶的纯化与非天然氨基酸的底物特异性检测[J].湖北大学学报：自然科学版, 2010, 32(2):4.DOI:10.3969/j.issn.1000-2375.2010.02.022.