人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒的检测原理与稳定性

2025/9/15 11:52:32 作者:流风

人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒是一种常见的生物检测试剂盒,它采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术(ELISA),在生物化学研究领域中可用于测定样品中人热休克蛋白90水平。人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒的检测范围为62.5pg/mL– 2000 pg/mL,它的灵敏度最低检出剂量小于10pg/mL。

使用人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒分析示意图

图1 使用人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒分析示意图

基本介绍

热休克蛋白 90(HSP-90)是一种重要的伴侣蛋白,它通过协助其他蛋白质正确折叠、维持蛋白质结构稳定性以抵抗热应激,并参与蛋白质的降解过程来发挥功能。作为热休克蛋白家族的一员,HSP-90是各类生物中表达最丰富的细胞蛋白之一,在细胞应对高温等胁迫条件时起关键保护作用。在正常生理状态下,热休克蛋白约占细胞总蛋白的1-2%,而当细胞暴露于热激环境中时,其表达量可显著上升至4-6%。对该蛋白的定量检测可使用人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒进行,该试剂盒能够灵敏、特异地测定样本中HSP-90的浓度。[1]

检测原理

向预先包被了抗人热休克蛋白90(HSP-90)抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗人热休克蛋白90(HSP-90)抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后,在450 nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的人热休克蛋白90(HSP-90)浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线,利用人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒计算出样本中人热休克蛋白90(HSP-90)的浓度。

稳定性

经测定,人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒在有效期内务必按推荐温度保存,活性降低率小于5%。为减小外部因素对人热休克蛋白90(HSP-90)Elisa试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。

参考文献

[1] Businaro R, et al. Heat-shock protein 90: a novel autoantigen in human carotid atherosclerosis[J]. Atherosclerosis, 2009, 207: 74-83.

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