背景及概述
人ADROPIN蛋白(AD)ELISA检测试剂盒是研究能量代谢和相关疾病的重要工具。选择一款高灵敏度、高特异性、经过验证的试剂盒,并严格按照操作规程进行实验,是获得可靠、可重复数据的关键。建议在购买前咨询供应商的技术支持,并提供您的具体实验需求。
AD简介
ADROPIN蛋白(AD)是一种多肽激素,由Kumar[1]等人在2008年发现,这种蛋白质由76个氨基酸组成,它最初被描述为一种分泌肽,其中1-33号残基编码一个分泌信号肽序列。该蛋白由Enho基因编码,主要在肝脏和中枢神经系统中表达。它参与碳水化合物-脂质代谢、代谢性疾病、中枢神经系统功能、内皮功能和心血管疾病。
工作原理
人ADROPIN蛋白(AD)ELISA检测试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。测定样品中人Adropin蛋白水平。向预先包被了抗人Adropin蛋白抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗Adropin蛋白抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后,在450nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的人Adropin蛋白浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线计算出样本中人Adropin蛋白的浓度。

图1 人ADROPIN蛋白(AD)ELISA检测试剂盒实物图
使用注意事项
仔细阅读说明书:不同品牌的人ADROPIN蛋白(AD)ELISA检测试剂盒操作步骤和反应时间可能略有差异,务必严格遵循其特定protocol。
充分回温:所有试剂在使用前应恢复到室温(18-25°C),并轻轻摇匀,但避免产生气泡。
精确稀释:标准品的稀释和浓缩洗涤液的稀释必须准确。
规范操作:使用合适的移液器,避免交叉污染。孵育时使用封板膜密封。
充分洗涤:洗涤是ELISA实验成败的关键,务必保证每次洗涤都充分彻底。
控制反应时间:显色时间需严格控制,过长或过短都会影响结果准确性。
标准曲线:每次实验都必须同时做标准曲线。建议做复孔以提高准确性。
参考文献
[1]Kumar KG, et al.Identification and characterization of a novel hormone-like protein (adropin) encoded by the Energy Homeostasis Associated (ENHO) gene. [J]PLoS One. 2008;3(9):e4014.