二乙基磷乙酸CAS号为3095-95-2，分子式: C6H13O5P，分子量: 196.14。透明或黄色粘性液体，用于为分子内HEW反应提供膦酸酯中间体。目前，针对二乙基磷乙酸的相关分析方法尚无文献报道，为了保证生产和研发质量，需要对其质量进行控制，因此，研发一种二乙基磷乙酸含量检测方法，对医药行业来说显得尤为迫切和重要。
分析方法[1]
仪器：一套简单高效液相色谱仪，包括液相泵、紫外检测器、进样器；
试剂：磷酸二氢钾（分析纯）、乙腈（色谱纯）、磷酸（分析纯）；
色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱。
色谱纯度测定：按照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录VD）测定。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基键合硅胶为填充剂；以0.02mol/L磷酸 二氢钾（用磷酸调pH值为3.0）-乙腈（90∶10）为流动相A，0.02mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调pH值为3.0）-乙腈（20∶80）为流动相B，洗脱程序如表所示，检测波长为210nm，流速0.8ml/min，柱温为30℃。取二乙基磷乙酸对照品适量，用10%乙腈溶解并稀释制成每1ml中约含5mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取空白溶液和对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以理论塔板数按二乙基磷乙酸峰计算不得低于2500。
测定：取样品约100mg，精密称定，置20ml量瓶中，加10%乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按峰面积归一化法计算二乙基磷乙酸的色谱纯度，纯度为98.85%。
结果：二乙基磷乙酸样品中杂质可得到有效分离，分离度大于1.5，峰形良好，峰纯度良好，理论塔板数大于2500，拖尾因子小于1.5，样品中二乙基磷乙酸的纯度为98.85%，
参考文献
[1]江苏万邦生化医药股份有限公司,上海复星医药(集团)股份有限公司. 一种二乙基磷乙酸的高效液相分析方法:CN201510968843.5[P]. 2019-11-22.