人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）可体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中人低分子肝素浓度。人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒的检测范围为12.5 ng/mL – 400 ng/mL，该试剂盒常用的样本类型为血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本。
图1 使用人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒的示意图
检测原理
图2 人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒的组成
人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒的检测原理为将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。[1]
操作步骤
人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒的操作步骤：首先于各孔中分别加入100μL标准品或待测样本，37℃孵育90分钟；随后加入100μL生物素化抗体工作液，同条件孵育60分钟；完成3次洗涤后，加入100μL酶结合物工作液，37℃孵育30分钟；经5次洗涤后，加入90μL底物溶液，37℃避光孵育约15分钟；最后加入50μL终止液，立即于450 nm波长下测定吸光度值，并根据标准曲线计算待测样本浓度。
使用说明
使用人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒时应该注意当混合或重溶蛋白溶液时，尽量避免起沫。为了避免交叉感染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。使用人低分子肝素(LMWH)Elisa试剂盒混合后的显色底物在上板前应为无色，请避光保存。
参考文献
[1] Sun Z, et al. Inhibitory effect of low molecular weight heparin on the secretion of vascular endothelial growth factor by tumor cells in vitro[J]. Chinese Journal of Oncology], 2009, 31: 826-830.