人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT的特点及检测原理

2025/12/11 9:49:40 作者:飞斯

背景及概述

人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT,即人皮质醇酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、唾液及细胞培养上清液中的皮质醇的ELISA试剂盒。

皮质醇简介

皮质醇(Cortisol),也称氢化可的松(Hydrocortisone)或化合物F(Compound F),是从肾上腺皮质中提取的对糖类代谢具有最强作用的肾上腺皮质激素,属于糖皮质激素的一种。皮质醇有多种作用,但最为人所熟知的就是它对新陈代谢和免疫系统功能的影响。它是胆固醇的代谢物和其它类固醇激素激素如盐皮质激素、雌激素、雄激素和孕激素的前体。皮质醇水平由下丘脑-垂体-肾上腺轴控制。垂体前叶释放的促肾上腺皮质激素调控肾上腺皮质分泌皮质醇。ACTH的分泌受到促肾上腺皮质激素释放激素和精氨酸加压素等多肽的调控[1]。而皮质醇对CRH的释放具有抑制作用。正常的皮质醇代谢遵循一种生理节奏,是一个周期为24小时的循环,一般皮质醇水平最高点在早晨约6-8点,最低点在凌晨约0-2点。

人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT的特点

人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为78pg/ml,与皮质醇的交叉反应性为100%,与11-脱氧皮质醇的交叉反应性为0.9%,与氢化泼尼松的交叉反应性为5.6%,与皮质酮的交叉反应性为0.6%,与脱氧皮质酮、孕酮、17-己酸羟孕酮、睾酮、雌三醇、达那唑等的交叉反应性小于0.1%,板内、板间变异系数均小于10%。

检测原理

人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT采用竞争法检测样品中Cortisol的浓度,其原理见图1。

图1 人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT检测原理.png

图1 人皮质醇(CORTISOL)ELISA KIT检测原理

高特异性识别Cortisol的抗体已预包被于酶标板上,同时加入样品和辣根过氧化物酶标记Cortisol,样品中的Cortisol与辣根过氧化物酶标记Cortisol竞争性结合酶标板中包被的抗体。随后洗去游离的Cortisol与游离的辣根过氧化物酶标记Cortisol。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的TMB氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。如果样本中Cortisol含量越多,则与抗体结合的辣根过氧化物酶标记Cortisol就越少,颜色越浅,即颜色与样品中的浓度成反比。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。Cortisol浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中Cortisol浓度。

参考文献

[1]梁文涛,刘畅,万修华,司宇光.2型糖尿病并发视网膜病变患者血清皮质醇、肌生成抑制素、 SCUBE-1水平变化及临床意义.[J]国际检验医学杂志.2023-07-30.

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