简介
在胃癌组织微阵列研究中，HIF1A抗体通常选用兔源多克隆类型，推荐工作浓度1:500，配套枸橼酸盐缓冲液（pH 6.0）高温抗原修复可充分暴露核内抗原表位；随后4 °C过夜孵育HIF1A抗体，再与HRP标记的二抗（1:5000）室温反应1 h，DAB显色即可获得定位清晰、背景极低的棕黄色颗粒。该HIF1A抗体在石蜡切片上可同时显示胞核与胞质阳性信号，染色强度按0–3分半定量，与临床病理参数进行统计学分析时批间差异<5 %。通过设置PBS替代阴性对照、CoCl₂诱导的胃癌细胞球阳性对照以及内源性过氧化物酶阻断实验，可进一步验证HIF1A抗体的特异性与灵敏度，为高通量回顾性研究提供稳定、可重复的技术保障[1]。
HIF1A抗体的性状
用途
HIF1A抗体不仅适用于免疫组化，也能在ELISA与Western blot中保持高识别效率。IHC结果显示肿瘤组织阳性率显著高于癌旁，趋势与TCGA数据库mRNA差异一致；ELISA检测血清游离HIF1A，证实抗体可捕捉天然构象蛋白，与组织水平呈正相关。Western blot中抗体可检出约120 kDa单一条带，无杂带干扰。重复芯片实验显示批间ICC>0.92，AUC=0.835，灵敏度86%，特异度78%，充分证明该抗体在不同实验体系中的稳定性与诊断价值[1]。
病理意义
借助HIF1A抗体进行免疫组化评分发现，阳性信号与血管侵犯、神经侵犯及T3以上浸润深度显著相关，且染色强度每增加1分，患者死亡风险升高约40%。Kaplan-Meier分析显示抗体阴性组中位总生存42.4个月，阳性组仅23.3个月，差异有统计学意义。多因素Cox证实HIF1A抗体阳性为独立不良预后因子，HR值达3.2。由此可见，该抗体不仅能反映肿瘤缺氧微环境活性，还可作为术后风险分层、靶向治疗筛选及疗效动态监测的重要免疫工具[1]。
参考文献
[1] 王心平. 益气化瘀解毒方靶向的HIF-1A在胃癌中表达的临床意义和预后价值[D]. 南京: 南京中医药大学, 2025.