简介
人三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒是一种高灵敏度、高特异性的体外定量检测工具,用于测定人血清、血浆或细胞培养上清液中总三碘甲状腺原氨酸(Total T3)浓度。该试剂盒采用经典双抗体夹心酶联免疫法:微孔板预包被抗T3单克隆抗体,与样本中的T3结合后,经生物素-链霉亲和素-HRP系统放大信号,最后以TMB显色,450 nm波长读取吸光度,四参数逻辑曲线拟合计算浓度。

人三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒的性状
使用方法
人三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒的样本处理步骤如下:血清需在室温静置2小时或4°C过夜后1000×g离心20分钟取上清;血浆用EDTA或肝素抗凝,采集后30分钟内2–8°C 1000×g离心20分钟;组织匀浆按1:9(g/mL)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)冰浴研磨,可超声或反复冻融裂解后5000×g离心5–10分钟取上清;细胞培养上清或其他生物液体均1000×g离心20分钟取上清。所有样本可分装后−20°C或−80°C保存,但检测前须避免反复冻融,以保证T3测定结果的准确性与重复性[1]。
注意事项
人三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒在操作前需先自2–8 °C取出并室温平衡30 min以上,开封后的酶标条应立即装入密封袋防潮;底物B对光高度敏感,需全程避光。加样时务必使用校准过的移液器或排枪,5 min内完成以避免蒸发差异,并同步运行标准曲线,若样本OD值超过最高浓度孔,需用随盒稀释液先行稀释再测,终结果乘以稀释倍数。试剂配制阶段须用旋涡混匀仪充分混匀,加液后置于微量振荡器低频率震荡1 min或手工轻柔圆周晃动,确保孔内反应均匀;所有洗涤步骤均要求0.35 mL洗涤液注孔浸泡1–2 min,手工洗板需甩液、拍干、重复数次,自动洗板机应先预熟练后方可用于正式实验。全过程佩戴手套,终止液为2 M硫酸,按生物危废收集;不同批号试剂禁止混用,剩余试剂立即盖紧保存,以保证人三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒的检测精度与批间一致性[2]。
参考文献
[1]全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会(SAC/TC 136). 游离三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒: YY/T 1724-2020[S]. 中国标准出版社, 2020.
[2]吴学炜, 三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒的开发和应用. 河南省, 郑州安图绿科生物工程有限公司, 2012-03-27.