研究背景
淫羊藿总黄酮(total flavonoid of Herba Epimedii，HEP)是从小檗科植物淫羊藿的茎叶中提取的总黄酮类成分，主要含有淫羊藿苷(icariin，ICA)和朝藿定B(Epimedin B)等。现代药理学研究发现，淫羊藿总黄酮是淫羊藿促进免疫功能，参与骨代谢，抗肿瘤，增强心血管活动以及发挥神经保护作用等功能的有效成分。朝藿定 B是HEP的单体黄酮类活性化合物，主要来自小檗科植物心叶淫羊藿的干燥地上部分，含量仅次于淫羊藿苷[1]。该物质化学式为C38H48O19，分子量808.78，常温下呈黄色结晶粉末，具有补肾阳、强筋骨及祛风湿等药理作用。
制备方法
文献报道了一种同时制备淫羊藿苷，朝藿定A，朝藿定 B，朝藿定 C化学对照品的分离制备方法。以含量为10%-50%的淫羊藿苷提取物为原料，经初步柱分离，以制备型高效液相色谱为主要分离手段，通过两步高效液相制备，提取液直接减压浓缩至干即可获得纯度大于98%的朝藿定A，B，C和淫羊藿苷化学对照品。该发明工艺步骤简单，纯度高，色泽好，并且可大规模生产[2]。
应用
细胞生物学和药理学领域报道了朝藿定 B在制备治疗神经炎症的药物中的应用。朝藿定 B可以减少炎性因子的释放，降低多巴胺能神经元损伤，对由于多巴胺能神经元损伤引起的帕金森病具有一定的预防和保护作用，可用于制备预防和/或治疗神经炎症及其相关疾病的药物。该发明的应用具有较高的临床应用价值和开发前景[3]。
有机合成领域有关报道则表明，以朝藿定 B为原料可制备得到箭藿苷B。在该物质的制备过程中，酶解反应的最适条件为温度50℃，反应介质（pH5.6）醋酸-醋酸钠缓冲液，底物质量浓度20g·L-1，酶与底物质量比3：5，反应时间24h，反应产物相对分子质量646.23。该工艺简单可靠，反应条件温和，适合工业化生产[4]。
药物代谢研究
为了探讨朝藿定 B在大鼠体内的代谢产物及转化途径，研究人员选择SD大鼠12只，分为2组，肌肉注射组和口服给药组，收集给药前和给药后0～24h尿样和粪便样品，采用高效液相色谱一串联线性离子阱静电场轨道阱质谱仪(LC-LTQ OrbitrapMSn)检测。通过比较给药前后各组总离子流色谱图，对尿和粪便中推测的代谢物和标准物质的出峰时间及相关化合物的多级串联质谱数据进行了分析，结果在粪便中发现了14种药物代谢产物，系统分析了这些代谢产物的代谢转化规律及可能的结构。而尿液中代谢产物的数量和含量远低于粪便，最终在尿液中找到的4种微量代谢产物，其在粪便中均有发现。故可得出结论，朝藿定 B在大鼠体内的主要转化途径为结合，水解，氧化，加成及脱甲基反应等[5]。
抗炎活性研究
实验探讨朝藿定 B对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的抑制作用及雌激素受体(ER)特异性阻断剂ICI 182,780的阻断效应。具体地，常规培养BV2小胶质细胞，加或不加朝藿定 B，LPS，ICI 182，780处理，采用3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5二苯基溴化四唑(MTT)比色法检测细胞活力，实时聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达。
结果，不同浓度朝藿定 B对BV2小胶质细胞活力没有影响(P>0.05)。LPS可明显上调促炎因子TNF-α(F=10.64，q=9.157，P<0.001)和IL-6(F=25.25，q=12.630，P<0.001)mRNA的表达；1，10μmol/L朝藿定 B预处理均能明显抑制LPS诱导的TNF-αmRNA表达上调(q=4.655，5.408，P<0.05)，10μmol/L朝藿定B对LPS诱导的IL-6 mRNA表达有明显的抑制作用(q=4.696，P<0.05)。朝藿定 B对LPS诱导的TNF-α和IL-6 mRNA表达的抑制作用可被ICI 182，780所阻断(F=12.53，28.71，q=5.318，4.684，P<0.05)。也就是说，朝藿定 B能够抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞促炎因子的表达，其机制可能与ER信号途径有关[6]。
参考文献
[1]王皓田.Epimedin B抗LPS诱导的原代星形胶质细胞炎症反应的作用机制研究[D].青岛大学.
[2]肖红斌,王莉,雷宇佳.同时制备淫羊藿苷、朝藿定A、B、C化学对照品的方法[J].中国科学院大连化学物理研究所, 2010.
[3]陈文芳,王皓田,张梅,等.朝藿定B在制备治疗神经炎症的药物中的应用:CN201911034600.9[P].
[4]徐凤娟,孙娥,张振海,等.纤维素酶转化朝藿定B制备箭藿苷B的研究[J].中国中药杂志, 2014, 39(2):235.DOI:10.4268/cjcmm20140214.
[5]高路,余捷婧,詹晶晶,等.朝藿定B在大鼠体内的药物代谢研究[J].中药新药与临床药理, 2017, 28(5):6.DOI:10.19378/j.issn.1003-9783.2017.05.016.
[6]胡子凡,谷雨,范育辰,等.朝藿定B对BV2小胶质细胞炎症反应的作用及机制[J].青岛大学学报:医学版, 2023, 59(3):333-336.DOI:10.11712/jms.2096-5532.2023.59.092.