简介
人非小细胞肺癌细胞（如A549、SK-MES-1、H1299、H1975细胞系）是一类来源于肺腺癌、肺鳞癌等非小细胞肺癌组织的恶性肿瘤细胞，具有无限增殖、异常分化和侵袭转移的生物学特征，是肺癌体外研究的经典模型。这类细胞可在含血清与双抗的完全培养基中稳定培养，复苏后于37℃、5%CO₂条件下贴壁生长。研究表明，罗汉果醇可呈浓度依赖性地抑制人非小细胞肺癌细胞的增殖活性，且对正常支气管上皮细胞HBE无明显毒性，其中A549和SK-MES-1细胞对罗汉果醇的敏感性更高。
人非小细胞肺癌细胞的性状
培养方法
（1）细胞复苏：从液氮中取出冻存的人非小细胞肺癌细胞，迅速置于37℃水浴锅中摇晃融化，在低速离心机中，1000 rpm离心3 min后，弃掉上层液体，下层沉淀用正常培养基重悬后，置于细胞培养皿中，以画“十”字的方式充分混匀细胞悬液，置于细胞培养箱中培养。（2）细胞培养：将复苏后的人非小细胞肺癌细胞置于细胞培养箱中过夜培养贴壁，培养箱设置参数为95% O₂、5% CO₂、37℃，每两天为细胞更换新鲜培养基，待细胞达到80%左右融合度时，进行细胞消化和细胞接种等操作。（3）细胞消化：当人非小细胞肺癌细胞达到80%融合度时，弃掉细胞培养液，用37℃预温的PBS清洗细胞培养皿两遍，加入胰酶消化细胞，用新鲜培养基终止消化，用移液枪将细胞吹下并转移至离心管中，1000 rpm离心3 min，弃掉上清液，将下层沉淀用新鲜培养基重悬，接种到新的培养皿或孔板中，或进行后续实验操作[1]。
罗汉果醇处理对人非小细胞肺癌细胞生长的抑制作用
为了检测罗汉果醇对非小细胞肺癌细胞株的药理学作用，以人支气管上皮细胞系HBE作为正常对照细胞，采用不同浓度的罗汉果醇处理人源非小细胞肺癌细胞系A549、SK-MES-1、H1299和H1975细胞48 h，之后用CCK-8检测各细胞的增殖活性。结果显示，与溶剂对照组（0 μM）相比，罗汉果醇呈药物浓度依赖性地抑制四种非小细胞肺癌细胞的增殖；25 μM及以上浓度的罗汉果醇处理可显著抑制A549和SK-MES-1细胞的增殖活性，50 μM及以上浓度的罗汉果醇处理可显著抑制H1299和H1975细胞的增殖活性；而25和50 μM罗汉果醇处理对HBE细胞的增殖活性无显著影响，相同浓度的罗汉果醇对四种人非小细胞肺癌细胞株的生长抑制作用更加显著，且IC₅₀值显著更小。结果表明，与对照细胞HBE细胞系相比，罗汉果醇对非小细胞肺癌细胞有更好的生长抑制作用。
因A549人肺腺癌上皮细胞和SK-MES-1人肺鳞癌细胞是常用的代表性非小细胞肺癌细胞，后续研究采用这两种细胞进行。为准确反映罗汉果醇干预对正常HBE细胞的增殖活性无明显影响，而仅显著抑制A549和SK-MES-1细胞的增殖活性，故选取50 μM作为后续细胞水平实验的罗汉果醇处理浓度[1]。
参考文献
[1] 李鹤. 罗汉果醇抑制非小细胞肺癌细胞生长的作用和分子机制研究[D]. 四川大学, 2023. DOI:10.27342/d.cnki.gscdu.2023.001959.