SK-HEP-1是一种历史悠久但分类特殊的人源细胞系。1971年，该细胞系建立自一名52岁白人男性癌症患者的肝脏腹水,细胞形态为典型的上皮细胞样，以贴壁生长的方式进行增殖，其染色体核型分析为亚三倍体（Hypotriploid），染色体计数范围较宽，性别鉴定为女性（XX），具有强大的致瘤能力，在免疫缺陷小鼠（如裸鼠）体内能高效形成肿瘤。
主要应用领域
SK-HEP-1细胞系在多个生物医学领域有广泛应用：在肿瘤学与血管生成研究中，作为研究肝癌、尤其是肿瘤血管生成的经典体外模型。其形成的血管样结构使其成为筛选抗血管生成药物的理想平台。在药物筛选与毒理学中，广泛用于抗肿瘤药物的体外筛选和评估，以及化合物的肝毒性测试。在癌症转移机制研究中，常用于构建裸鼠皮下移植瘤模型，以研究肿瘤的生长、侵袭、转移机制以及相关基因的功能。
肝癌是全球范围内发病率与死亡率均居高不下的恶性肿瘤，严重威胁人类健康。在肝癌基础研究和药物开发过程中，合适的细胞模型至关重要。研究表明，SK-HEP-1 人肝癌细胞对达沙替尼（dasatinib）和 Ponatinib 均表现出高度敏感性，其作用机制与上调 E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达密切相关。此外，通过电穿孔技术成功构建了稳定高表达人 GPC3 的 SK-HEP-1 人肝癌细胞系，为肝癌靶向治疗研究提供了重要的细胞模型。这些发现进一步确立了 SK-HEP-1 人肝癌细胞作为肝癌基础与临床研究重要工具的地位。
达沙替尼对 SK-HEP-1 人肝癌细胞的抑制作用
研究系统评价了多靶点激酶抑制剂达沙替尼对 SK-HEP-1 人肝癌细胞的影响。研究者首先比较了达沙替尼对五种肝癌细胞系（SK-HEP-1、Bel-7402、SNU-423、SNU-387、Huh-7）的增殖抑制作用，结果发现 SK-HEP-1 人肝癌细胞对达沙替尼最为敏感。这一结果表明，SK-HEP-1 人肝癌细胞是研究达沙替尼抗肝癌作用的理想模型[1]。
进一步的功能实验显示，达沙替尼处理可显著促进 SK-HEP-1 人肝癌细胞的聚集和黏附。细胞缓慢聚集实验证实，随着达沙替尼浓度的升高，癌细胞形成的分散团块数从对照组的（157.7 ± 9.6）个分别降至（118.0 ± 9.8）个、（31.3 ± 10.0）个和（2.7 ± 1.5）个。细胞分离实验也证实，达沙替尼处理组 SK-HEP-1 人肝癌细胞的 NTC/NTE 比值显著降低，表明细胞间黏附力增强[1]。
划痕实验结果表明，达沙替尼能够显著抑制 SK-HEP-1 人肝癌细胞的迁移能力。Western blot 分析进一步揭示，达沙替尼处理可浓度依赖性地上调 SK-HEP-1 人肝癌细胞中 E-cadherin 的表达水平。研究者推测，达沙替尼可能通过抑制 Src 激酶活性，减少 E-cadherin 的溶酶体降解，从而促进该细胞的聚集和黏附，抑制其增殖、分散和迁移[1]。
Ponatinib 对 SK-HEP-1 人肝癌细胞的抑制作用
在同一研究团队的后续工作中，比较了包括 Ponatinib 在内的 24 种酪氨酸激酶抑制剂对 SK-HEP-1 人肝癌细胞的作用。令人瞩目的是，在这 24 种抑制剂中，Ponatinib 对该癌细胞的抑制作用最强，显著优于其他抑制剂。功能实验同样证实，Ponatinib 能够促进 该癌细胞的聚集和黏附，Western blot 分析再次证实，Ponatinib 可浓度依赖性地诱导 SK-HEP-1 人肝癌细胞中 E-cadherin 的表达上调[2]。
比较两项研究可以发现，SK-HEP-1 人肝癌细胞对 Ponatinib 的敏感性高于对达沙替尼的敏感性，提示 Ponatinib 可能是更有效的 癌细胞生长抑制剂。两种药物均通过上调 E-cadherin 发挥作用，表明这一机制在 SK-HEP-1 人肝癌细胞中具有普遍意义。
SK-HEP-1 人肝癌细胞作为基因工程改造的宿主细胞
除了作为药物敏感性研究的模型外，SK-HEP-1 人肝癌细胞还被广泛用于基因功能研究和蛋白表达系统的构建。实验中成功构建了稳定高表达人 GPC3 的 SK-HEP-1 人肝癌细胞系。GPC3（Glypican-3）是肝细胞癌的重要标志物，在 72%~81% 的肝癌患者中高表达，但在正常肝组织中几乎不表达，因此成为肝癌靶向治疗和诊断的理想靶点。然而，天然表达 GPC3 的肝癌细胞系（如 HepG2）表达量普遍较低，难以满足研究需求。为此，研究者选择 SK-HEP-1 人肝癌细胞作为宿主细胞，这是因为该癌细胞本身几乎不表达 GPC3 蛋白，适合作为外源 GPC3 表达的背景细胞。通过电穿孔法将 pcDNA3.1-GPC3 真核表达载体转染至 SK-HEP-1 人肝癌细胞后，经 G418 筛选（最佳筛选浓度为 700 μg/mL），成功获得了稳定表达 GPC3 的 SK-HEP-1/GPC3 细胞系。Western blot 和流式细胞术鉴定结果显示，该细胞系不仅在细胞表面稳定表达 GPC3 蛋白，且表达量显著高于天然表达 GPC3 的 HepG2 细胞，阳性率达到 100%[3]。
这一 SK-HEP-1 人肝癌细胞来源的稳转细胞系的建立，为后续 GPC3 治疗性抗体的筛选、验证和功能研究提供了理想的细胞模型，也展示了 SK-HEP-1 人肝癌细胞作为基因工程宿主细胞的巨大潜力。
参考文献
[1] 刘畅, 裴晋红, 穆秀丽, 等. 达沙替尼(dasatinib)通过上调上皮钙黏蛋白表达抑制SK-Hep-1人肝癌细胞的增殖、分散和迁移[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2021, 37(9):801-807.
[2] 刘畅, 裴晋红, 穆秀丽, 等. 多靶点蛋白酪氨酸激酶抑制剂Ponatinib对人肝癌细胞SK-Hep-1增殖、黏附和迁移能力的影响[J]. 中国生物制品学杂志, 2023, 36(6): 668-672,679.
[3] 何琦琳, 郎巧利, 余琳, 等. 稳定高表达人GPC3的SK-Hep-1细胞系的构建[J]. 中国比较医学杂志, 2020, 30(2): 59-63.