渥曼青霉素(wortmannin,WM)是一种真菌代谢产物,其通过与磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidyli-nositol-3 kinase,PI3K)的催化亚单位pll0结合，非竞争性和不可逆地抑制PI3K激酶活性,从而阻断PI3K/Akt信号通路,是PI3K的特异性抑制剂。渥曼青霉素对多种进展期肿瘤如结肠癌、肺癌、胃癌、乳腺癌等都有治疗作用,尤其是胃癌的预防和治疗方面具有重大的应用前景。
活性研究
王晓南等人研究PI3K/Akt抑制剂渥曼青霉素对白血病细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以不同浓度的渥曼青霉素作用于人类髓细胞白血病细胞K562,采用MTT法检测细胞增殖活性,单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA损伤形成的"彗星"样拖尾现象,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡,Western blotting、RT-PCR检测渥曼青霉素作用K562细胞后总Akt和磷酸化Akt以及NF-κB基因及蛋白表达水平的变化。结果:渥曼青霉素以时间-剂量依赖性方式抑制K562细胞的增殖,其24h的IC50是25nmol/L.渥曼青霉素诱导K562细胞发生凋亡,其作用呈明显剂量依赖性增强.渥曼青霉素作用后K562细胞DNA链断裂,呈现"彗星"拖尾现象,其尾长与拖尾率显著高于对照组(P<0.01)。渥曼青霉素能同时在蛋白和基因水平,以剂量依赖性方式抑制磷酸化Akt以及NF-κB表达,但对总Akt蛋白没有明显影响。结论:渥曼青霉素以时间和剂量依赖方式明显抑制K562细胞的增殖及诱导其凋亡,其机制可能与其下调磷酸化PI3K/Akt信号通路以及NF-κB蛋白表达有关[1]。
刘杉珊等人探讨了氟尿嘧啶(Fu)联合渥曼青霉素(wortmannin)对人野生型及突变型p53结肠癌细胞株(HCT-116和SW-480)增殖和凋亡的影响,阐明p53对人结肠癌细胞增殖和凋亡的作用。方法:将处于对数生长期的HCT-116和SW-480人结肠癌细胞株分为空白对照组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶联合渥曼青霉素组和氟尿嘧啶联合渥曼青霉素及p53抑制剂(PFT-α)组,分别给予氟尿嘧啶、渥曼青霉素及PFT-α,采用噻唑盐比色法(MTT)、Annexin V-FITC流式细胞术(FCM)检测各组细胞12、24和48h的存活率和细胞凋亡率。结果:与氟尿嘧啶组比较,渥曼青霉素联合氟尿嘧啶组HCT-116和SW-480细胞存活率显著降低(P＜0.05),并随时间延长而逐渐降低；流式细胞术(FCM)检测,各组细胞凋亡率随时间的延长而增高(P＜0.05)；与渥曼青霉素联合氟尿嘧啶组比较,氟尿嘧啶联合渥曼青霉素及PFT-α组HCT-116细胞存活率及细胞凋亡率无明显变化(P＞0.05),而SW-480细胞48h的存活率显著降低(P＜0.05),凋亡率显著增高(P＜0.05)。结论:渥曼青霉素能显著增强氟尿嘧啶对人结肠癌细胞增殖的抑制作用并促进结肠癌细胞凋亡；抑制p53表达能进一步增强渥曼青霉素联合氟尿嘧啶对p53突变型SW-480细胞增殖的抑制作用并促进细胞凋亡[2]。
参考文献
[1] 王晓南,吴青,张连生,等. PI3K/Akt抑制剂渥曼青霉素对白血病细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志,2010,17(1):82-87. DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2010.01.016.
[2] 刘杉珊,杨岩,焦本蒸,等. 氟尿嘧啶联合渥曼青霉素对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报（医学版）,2013,39(1):29-33. DOI:10.7694/jldxyxb20130108.