伊红美蓝琼脂(EMB)是一种弱选择性、差异显色培养基,专用于分离和鉴定革兰氏阴性肠道菌,尤其是大肠杆菌。它的核心价值在于通过菌落颜色,快速区分发酵乳糖的肠道菌(如大肠杆菌)和不发酵乳糖的致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌)。伊红美蓝琼脂(EMB) 历经百年,至今仍是兽医微生物学与临床检验中最直观、最经济的鉴别工具之一。
EMB的鉴别原理与典型特征
伊红美蓝琼脂(EMB) 含有伊红和美蓝两种染料,两者在pH值改变时会发生共沉淀。大肠杆菌因能强烈发酵乳糖产酸,使菌落形成特征性的蓝黑色并带有绿色金属光泽[1]。这一现象是该培养基最富标志性的反应,也是后续生化与分子鉴定的关键起点。例如,在犊牛肺源致病性大肠杆菌的研究中,分离株在伊红美蓝琼脂(EMB) 上同样呈现出“黑色带金属光泽的菌落”[2]。肉鸡源大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB) 上则形成“紫黑色、带有金属光泽的菌落”[3]。尽管光泽颜色存在细微差异,但均一致地反映了强发酵乳糖产酸这一核心代谢特征。
EMB在分离流程中的关键作用
在病原菌的分离鉴定工作中,伊红美蓝琼脂(EMB) 通常与麦康凯琼脂配合使用,形成“初筛—复确”的双重筛选体系。研究者通常先将样品划线于麦康凯琼脂,挑选粉红色菌落,再将纯化菌落转种至伊红美蓝琼脂(EMB) ,根据是否出现典型金属光泽菌落做出初步判断[1]。这一步骤极大地提高了筛选效率,为后续的革兰氏染色、生化鉴定(如甲基红、靛基质试验)以及16S rRNA基因扩增提供了可靠的目标菌落[1,2]。
EMB在不同动物源样本中的应用表现
综合相关研究可以发现,伊红美蓝琼脂(EMB) 对多种来源的致病性大肠杆菌均具有高度一致的鉴别能力。宠物犬源大肠杆菌在该培养基上形成光滑、整齐、黑色带金属光泽的菌落[1]。犊牛肺源致病性大肠杆菌在该培养基上产生黑色带金属光泽的菌落,且对营养要求很低[2]。肉鸡源大肠杆菌在其上形成紫黑色、带有金属光泽的菌落[3]。这些结果印证了伊红美蓝琼脂(EMB) 在鉴别肠道杆菌,尤其是大肠杆菌时的可靠性与稳定性。即便菌株来源不同(犬、牛、鸡),其在该培养基上的表型特征依然高度保守。
EMB的局限性与鉴定流程中的定位
尽管伊红美蓝琼脂(EMB) 特征显著,但它仅能作为初步鉴别手段。少数发酵迟缓的细菌或特殊血清型大肠杆菌可能不产生典型光泽[1,3]。因此,标准鉴定流程必须结合生化试验、16S rRNA基因测序及系统发育树分析[1,2]。在药敏试验中,伊红美蓝琼脂(EMB) 主要用于获取纯培养物,为后续纸片扩散法提供标准菌悬液[1,3]。
参考文献
[1] 谷振, 周变华, 韩少杰, 等. 3株宠物犬大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验[J]. 河南科技大学学报(自然科学版), 2018, 39(3): 71-76.
[2] 伍麦尔·麦海提, 阿吾提·买海提, 夏克热木·阿布力孜, 等. 犊牛肺源致病性大肠杆菌的分离鉴定及毒力基因检测[J]. 现代畜牧兽医, 2022(2): 36-41.
[3] 范雪, 石琇琳. 肉鸡大肠杆菌病的诊断与综合防治[J]. 中国畜牧业 . 2026 (04) : 109-110.