二氯荧光黄的应用信息

二氯荧光黄（2',7'-二氯荧光素，CAS：76-54-0）是呫吨类弱酸型荧光吸附指示剂，碱溶液呈现特征黄绿色荧光，适用pH 4~10体系。其核心用途为法扬司法银量滴定氯离子，计量点后AgCl沉淀吸附指示剂阴离子，沉淀由黄绿突变为粉红色，终点辨识度高；同时可作为pH荧光指示剂、薄层色谱显色剂。衍生物DCFH广泛用作生物体系活性氧荧光探针，用于氧化应激检测。该物质由苯酐与二氯间苯二酚缩合制备，需避光密封储存，具有一定黏膜刺激性。

应用信息

2,7-二氯二氢衍生物的合成:以二氯荧光黄为原料，无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为反应溶剂，1-羟基苯并三氮唑（HOBt）为缩合剂进行缩合反应得到。反应完成后，经过萃取，减压浓缩后得到粗产物，然后利用硅胶柱层析进行分离纯化得到中间体。中间体经硼氢化钠(NaBH4)还原得到粗产物，反应完成后经过萃取浓缩，硅胶柱层析，得到纯化后的终产物。通过酰胺缩合、还原反应得到10个2,7-二氯二氢荧光素衍生物（DCFH-1～10)，经核磁共振、高分辨质谱表征，衍生物结构正确[1]。

龚波林等人在pH为3.8～7.0范围内,利用Br₂(0.5mol/L H2SO4介质中,Br^-与BrO₃^-反应生成)与二氯荧光黄反应,使二氯荧光黄荧光猝。当加入水杨酸时,水杨酸的溴代反应使体系荧光增强,建立了荧光法间接测定痕量水杨酸的新方法。该体系激发波长,发射波长分别为λex505nm, λ em520nm。水杨酸浓度在2.0～48.0μg/L 范围内呈线性关系;检出限为2.0μg/L 。本法选择性好,用于脚癣药水中水杨酸的测定,结果满意[2]。

李学强等人以二氯荧光黄为指示剂,荧光法间接测定微量As³⁺的新方法。在pH=5.5～7.5中性缓冲介质中,I₂与二氯荧光黄反应,使二氯荧光黄的荧光猝灭,当加入As³⁺与I₂反应使体系荧光增强,体系激发波长和发射波长分别为λex＝508nm,λem＝524nm。As³⁺含量在1.0～80μg·L^-1范围内呈良好线性关系,检测限为1.0μg·L^-1。该方法灵敏度高,选择性好,用于工业废水和河水样品微量As³⁺的测定,结果满意[3]。

参考文献

[1] 朱家焱. 基于2，7--二氯二氢荧光素的辣根过氧化物酶荧光底物的制备及应用[D]. 广州:广州中医药大学,2023. DOI:10.7666/Y4178130.

[2] 龚波林. 以溴化钾-溴酸钾-2′,7′-二氯荧光素为试剂对痕量水杨酸的间接荧光测定法[J]. 分析化学,2001,29(9):1055-1057. DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2001.09.019.

[3] 李学强,龚波林. 2',7'-二氯荧光素荧光法测定环境样品中微量As(Ⅲ)的研究[J]. 光谱学与光谱分析,2000,20(3):420-422. DOI:10.3321/j.issn:1000-0593.2000.03.054.