免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）技术问世以来，是病理诊断、肿瘤分型与基础科研中最常用的检测手段之一。在免疫组化操作流程中，试剂滴加于组织切片表面，若缺乏有效的边界约束，液体易在表面张力作用下向外弥散流失，不仅造成抗体浪费，还可能因试剂覆盖不均而影响染色结果。此时，一种简单的工具，免疫组化笔便可以承担起界定反应区域、约束液体的关键职责。免疫组化笔通过在组织周围画圈形成疏水屏障，使抗体与试剂能够在限定区域内与组织充分结合，从而保障染色结果的稳定与可靠[4]。
免疫组化笔的基本原理，是在切片组织周围绘制一圈疏水性的油性笔迹，形成一道隔离带。采用免疫组化笔画圈后，试剂与组织的接触更加充分，操作中可显著减少抗体和试剂的用量，避免染色时液体流淌和扩散，提高操作速度并保证染色效果[4]。该研究对比了环保型免疫组化笔、进口免疫组化笔与国产免疫组化笔在免疫组化染色及PAS特殊染色中的表现，三组隔水率分别为100%、97.5%和97.5%，阳性率差异均无统计学意义，说明成熟的免疫组化笔产品在隔水性能上已能完全满足常规检测需求[4]。
免疫组化笔的应用并不局限于免疫组化染色本身。研究报道了一种利用免疫组化笔防止小标本裱片滑落的简易方法：用免疫组化笔在普通载玻片上间隔约1 cm画三条竖线，形成格子区间，制成特制载玻片，将小标本蜡片吸附于格子内，烤片后行HE染色、封片。结果显示切片整齐排列、裱片方向一致、无滑落现象，便于病理医师镜下阅片[3]。免疫组化笔画线快捷、笔液输出均匀、干燥较快，且笔迹不溶于酒精而溶于二甲苯，不影响后续HE染色及封片[3]。这一案例提示，免疫组化笔凭借其优异的书写与成膜特性，在基层医院病理科与科研机构中具有广阔的推广空间。
任何一种试剂耗材都有其适用边界，免疫组化笔也不例外。在组织芯片免疫组化中，若画圈出现缺口，或温盒放置不平整导致液体流失，仍可能出现边缘效应[1]。涂镇波等对比了保温小室与免疫组化笔在组织芯片染色中的应用效果，发现两种方式下芯片边缘与中央部位的平均光密度值差异均无统计学意义，保温小室因操作更为简单，在特定场景下可替代免疫组化笔[1]。此外，废旧免疫组化笔的处置同样值得关注，废旧免疫组化液体石蜡笔可通过回收与再灌注使耗材物尽其用，降低病理科的运行成本[2]。这提醒我们，免疫组化笔的选型、使用与回收管理，都应当纳入实验室精细化管理之中。
传统免疫组化笔多含有二甲苯等有机溶剂成分，长期接触可能对病理工作者的呼吸系统与血液系统造成潜在危害[4]。随着绿色实验室理念的普及，环保型免疫组化笔应运而生。利用环保型中性快干胶与环保型透明剂按比例混合，灌入水彩笔或废弃油性笔中制成无刺激性气味、无毒无害的环保型免疫组化笔，其隔水率与染色阳性率均达到甚至优于市售产品水平，且符合实验室环保要求，有利于保护工作人员的身体健康[4]。这一探让免疫组化笔的研发向“性能+安全+环保”的综合维度演进，为病理技术平台的绿色升级提供了新的思路。
从画圈界定反应区域，到辅助小标本制片，再到环保材料的革新应用，免疫组化笔这一小小的耗材在病理技术流程中扮演着至关重要的角色。它看似平凡，却关乎每一张切片的染色质量、每一位技术人员的操作效率与职业健康。在精准病理与绿色实验室并行推进的当下，正确认识并合理选用免疫组化笔，既是实验室质量控制的基础环节，也是科研试剂研发值得持续深耕的方向。
参考文献
[1] 涂镇波,李玲,冯安林,等.保温小室在组织芯片免疫组化中避免“边缘效应”的作用[J].临床与实验病理学杂志,2012,28(3):321-322.
[2] 郑燕璇,王晓鸿.废旧免疫组化液体石蜡笔的再利用技术[J].中国实用医药,2011,6(20):34-35.
[3] 李行,王明伟.介绍一种防止小标本裱片滑落的简易方法[J].诊断病理学杂志,2025,32(2):226-227.
[4] 杜阳.环保型免疫组化笔在免疫组化和特殊染色中的应用[C].(会议论文汇编)2023.