9-芴基甲基肼基甲酸酯是一种酰肼类化合物，常温常压下为白色至类白色固体粉末，具有较好的化学稳定性，它不溶于水但是可溶于醇类有机溶剂和二甲基亚砜。9-芴基甲基肼基甲酸酯可由其酰氯前体物质和肼通过缩合反应制备得到，该物质常用作生物化学合成基础试剂，可用于制备腙类席夫碱荧光生物探针。
制备方法
在0 °C下，将FmocCl（10 g，38.65 mmol）溶于600 mL乙腈（CH3CN）中形成的溶液，于2小时内逐滴加入到剧烈搅拌的、含肼水合物（19 g，386 mmol）的150 mL乙腈/水（CH3CN/H2O，1:1，v/v）混合溶液中；滴加完毕后，使反应混合物自然升温至室温并继续搅拌12小时，随后在真空下浓缩至150 mL并过滤，所得白色固体依次用水和己烷洗涤，真空干燥至恒重，即得到目标产物9-芴基甲基肼基甲酸酯（9.74 g，产率99%，熔点172-173 °C）。[1]
还原胺化反应
图1 9-芴基甲基肼基甲酸酯的还原胺化反应
将N-Boc醛（1.68 g，6.85 mmol，1当量）溶于乙醇（EtOH，30 mL）中的溶液，加入到9-芴基甲基肼基甲酸酯（9-fluorenylmethyl carbazate，2.09 g，8.22 mmol，1.2当量）中，加热回流反应16小时；随后在减压条件下除去挥发性溶剂，将残余物溶于甲醇（MeOH，50 mL）中，加入氰基硼氢化钠（NaBH3CN，1.29 g，20.5 mmol，3当量）和乙酸（AcOH，1.18 mL，20.5 mmol，3当量），再次加热回流16小时；反应完毕后冷却至室温并蒸发溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯（EtOAc，50 mL）中，依次用水（30 mL × 2）和饱和食盐水（30 mL）洗涤，经硫酸镁（MgSO4）干燥、过滤后减压蒸发；最后残余物通过柱层析纯化（洗脱剂为含0-20%乙酸乙酯的正己烷溶液），即可得到目标产物。[2]
参考文献
[1] Aza-Amino Acid Scanning of Secondary Structure Suited for Solid-Phase Peptide Synthesis with Fmoc Chemistry and Aza-Amino Acids with Heteroatomic Side Chains, Boeglin, Damien; et al, Journal of Combinatorial Chemistry (2005), 7(6), 864-878.
[2] Aza-isotryptophan: synthesis, Pictet-Spengler chemistry, incorporation and conformational analysis in peptides, and activity in modulators of the cluster of differentiation-36 receptor, Wei, Xiaozheng ; et al, ChemRxiv (2025), 1-25.