人脐血源单个核细胞的应用

2020/10/20 9:12:51

背景[1-6]

人脐带血单核细胞分离自正常人胎盘脐带组织。其中,脐带血单核细胞主要功能:(1)血液中的单核细胞是体积的白细胞。来源于骨髓髓系干细胞,随血液循环迁移至全身各器官组织中定位,并分化成为各种类型巨噬细胞。(2)单核细胞是机体防御系统的一个重要组成部分。它通过吞噬和产生抗体等方式来抵御和消灭入侵的病原微生物。

脐带血单个核细胞(Umbilical Cord Blood Mononuclear Cell,UCBMC)是脐带血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。单核细胞(Mo)是在血液中循环的未成熟的吞噬细胞。作为一种递呈抗原的免疫细胞,他们能吞噬和降解微生物和颗粒物质。

单核细胞能够分化为几类不同的细胞类型。单核细胞最常见的应用是体外分化成为单核细胞来源的树突状细胞(moDC),巨噬细胞和成骨细胞以及它们作为吞噬免疫细胞在免疫学和感染生物学方面的作用。

单核细胞(monocytes)是血液中的血细胞,也是体积的白细胞,是机体防御系统的一个重要组成部分。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞,并在骨髓中发育,当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。目前认为它是巨噬细胞和树突状细胞的前身,具有明显的变形运动,能吞噬、清除受伤、衰老的细胞及其碎片。

单核细胞还参与免疫反应,在吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细胞,诱导淋巴细胞的特异性免疫性反应。单核细胞也是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统,还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。与其他血细胞比较,单核细胞内含有更多的非特异性脂酶,并且具有更强的吞噬作用。当机体发生炎症或其他疾病都可引起单核细胞总数百分比发生变化,因此检查单核细胞计数成为辅助诊断的一种重要方法。

应用[7][8]

可用于人脐血单个核细胞对大鼠腓肠肌失神经损伤的治疗作用研究:

可制备大鼠坐骨神经离断后的腓肠肌萎缩模型,研究人脐血单个核细胞(CB-MNCs)肌肉多点注射对损伤的治疗效果。方法采集并制备新鲜人CB-MNCs;将30只4~6周龄Wistar大鼠随机分为正常对照组(Normal组,n=10)、CB-MNCs治疗组(Therapy组,n=10)和生理盐水治疗组(NS组,n=10),Therapy组和NS组大鼠离断坐骨神经,建立腓肠肌萎缩模型;在造模后第7天、第14天和第21天,分3次将CB-MNCs或等体积生理盐水多点注射到腓肠肌损伤局部,观察大鼠行动能力改变和足弓坏疽发展情况,并于第28天取样测定腓肠肌湿重比、肌肉横截面积,以及血液和腓肠肌中氧化应激相关指标、炎性因子水平和凋亡相关基因的表达,观察肌肉组织中血管内皮生长因子-α(VEGF-α)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌营养不良蛋白(Dystrophin)的表达变化。

结果:Therapy组大鼠足部坏疽面积和水肿程度明显比NS组减轻(P=0.002),而且Therapy组中腓肠肌湿重比较NS组升高(P<0.001);病理切片显示,Normal组、NS组和Therapy组肌肉横截面积分别为(12 452.0±202.8)、(6 287.0±142.2)和(8 193.0±115.5)μm2,差异有统计学意义(P<0.001)。与NS组相比,Therapy组血清和肌肉肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量明显降低,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量明显增高(P<0.001)。

Therapy组较NS组半胱天冬酶-3(Caspase-3)、促凋亡基因Bax、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达量降低,抑凋亡基因Bcl-2、白细胞介素-10(IL-10)、α-actin、Dystrophin和VEGF-α的mRNA表达量增高(P<0.05)。与NS组相比,Therapy组α-actin、Dystrophin和VEGF-α蛋白表达均增高(P<0.05)。免疫组化发现,NS组和Therapy组Dystro-phin表达均增加,但Therapy组明显高于NS组(P<0.05)。结论肌肉注射CB-MNCs可有效促进腓肠肌失神经损伤的伤口愈合,缓解萎缩、促进肌肉修复,并降低凋亡细胞比例。

参考文献

[1]Use of umbilical cord and cord blood-derived stem cells for tissue repair and regeneration[J].Esmaeil Biazar.Expert Opinion on Biological Therapy.2014(3)

[2]The effects of exercise and conjugated linoleic acid intake on IGF-1 and pro-inflammatory cytokines in atrophied skeletal muscle of rats[J].Sanghyun Kim,Kijin Kim.Integrative Medicine Research.2013(4)

[3]Role of satellite cells in muscle growth and maintenance of muscle mass[J].G.Pallafacchina,B.Blaauw,S.Schiaffino.Nutrition,Metabolism and Cardiovascular Diseases.2012

[4]Nerve-Muscle-Endplate Band Grafting:A New Technique for Muscle Reinnervation..[J].Liancai Mu,Stanislaw Sobotka,Hungxi Su.Neurosurgery.2011

[5]Electrical stimulation prevents apoptosis in denervated skeletal muscle[J].Takuya Arakawa,Akihiro Katada,Hiroshi Shigyo,Kan Kishibe,Masaaki Adachi,Satoshi Nonaka,Yasuaki Harabuchi.Neurorehabilitation.2010(2)

[6]Investigation of differentially expressed proteins in rat gastrocnemius muscle during denervation–reinnervation[J].Hualin Sun,Jie Liu,Fei Ding,Xiaodong Wang,Mei Liu,Xiaosong Gu.Journal of Muscle Research and Cell Motility.2006(3-4)

[7]Sustained Enhancement of Ca 2+Influx by Glibenclamide Induces Apoptosis in RINm5F Cells[J].Toshio Iwakura,Shimpei Fujimoto,Shinji Kagimoto,Akari Inada,Akira Kubota,Yoshimichi Someya,Yu Ihara,Yuichiro Yamada,Yutaka Seino.Biochemical and Biophysical Research Communications.2000(2)

[8]刘子琳,李栋,时庆,李聪,黄金献,朱华甦,鞠秀丽.人脐血单个核细胞对大鼠腓肠肌失神经损伤的治疗作用[J].山东大学学报(医学版),2019,57(02):61-69.

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