Bremelanotide
| 中文名称 | Bremelanotide |
|---|---|
| 中文同义词 | 布雷默浪丹 PT 141;醋酸PT141 PT141ACETATE;醋酸PT141 BREMELANOTIDE (PT141);布雷默浪丹杂质;布雷美拉肽;PT-141 布雷默浪丹;布美诺肽 |
| 英文名称 | Bremelanotide |
| 英文同义词 | BREMELANOTIDE;Brmelanotice;Ac-Nle-cyclo(-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-OH;Bremelanotide, PT141,PT-141;BREMELANOTIDE PT141;PT141 Acetate,BreMelanotide Acetate;Bremelanotide,α-MSH (PT-141);REMELANOTIDE |
| CAS号 | 189691-06-3 |
| 分子式 | C50H68N14O10 |
| 分子量 | 1025.18 |
| EINECS号 | 211-519-9 |
| 相关类别 | 多肽中间体;多肽;医药原料;肽类;药物多肽;Peptides;化工原料;药物肽 |
| Mol文件 | 189691-06-3.mol |
| 结构式 |  |
Bremelanotide 性质
| 密度 | 1.43 |
|---|---|
| 溶解度 | 可溶于DMSO（轻微）、甲醇（轻微）、水（轻微、超声处理） |
| 形态 | 固体 |
| 酸度系数(pKa) | 3.37±0.70(Predicted) |
| 颜色 | 白色至类白色 |
| 序列 | Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-OH Asp-Lys |
| 稳定性 | 未重组的冻干粉应按照小瓶的说明冷藏保存。用抑菌水复溶后，冷藏溶液需30天内使用。如果使用缓冲溶液，稳定性会提高。 |
| InChIKey | FFHBJDQSGDNCIV-MLYCVURTNA-N |
布雷默浪丹PT141，又称布美诺肽，其用于治疗女性性功能障碍药物，PT-141已在给药于正常绝经前妇女的Ⅰ期临床试验中显现阳性结果。PT141通过激活大脑中的内源性途径来调节性欲和性反应，帮助伴有低活跃性性欲障碍况的绝经前女性保持正常性欲。第一步：取CTC树脂，加DCM充分溶胀后，称取Fmoc-Lys(Boc)-OH加DMF溶解，冰浴下滴加2~3eq的DIEA活化后转入树脂中，7~10min后补加1eq的DIEA，继续反应2h后，洗涤，加甲醇/DCM/DIEA封闭液封闭两次，洗涤抽干，测量取代值。
第二步：将第一步树脂投入反应柱中，加DCM溶胀，加20%PIP/DMF脱除Fmoc，DMF和DCM交替洗涤，用茚三酮检测，结果应呈阳性；DMF/DCM=3/1作为反应溶剂，加Fmoc-Trp(Boc)-OH、HOBT溶解后，加入DIEA，10~10℃条件下下加入HBTU活化10min；活化后转入反应柱中，常温下反应1h，用DMF和DCM洗涤，用茚三酮检测，结果应呈阴性；反应结束后，按照脱保护、洗涤、缩合循环进入下一步氨基酸的缩合，缩合的保护氨基酸依次为:Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-D-Phe-OH 、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH 、Fmoc-Nle-OH ；偶联完成后脱除N末端Fmoc保护基，加乙酰化试剂封端，甲醇收缩，抽干。
第三步：按1g树脂配置10ml全保护裂解液(1%~2%TFA/DCM或20%~30%TFE/DCM)，冰浴条件下加入树脂，开启搅拌；树脂完全加入后撤去冰浴，恢复室温反应1h。反应结束，过滤，树脂用DCM洗涤两次，合并滤液；向滤液中加入DIEA调溶液PH值至8-9，旋蒸拉干，加入预冷10%甲醇/水溶液沉淀，离心，打浆洗涤，抽干。
第四步：取上一步产物，加THF溶解，加入甲醇、三苯基膦溶解，通氮气保护，冰浴下滴加DEAD，滴加完成后，撤去冰浴，恢复室温反应4h。反应结束，旋蒸除去THF，加入MTBE析出，离心，打浆洗涤，抽干。
第五步：取上一步产物，按1g产品10ml的比例加入裂解液（TFA:Tis:H2O: 苯酚=92.5:2.5:2.5:2.5:2.5），室温反应1h。反应结束，加入预冷MTBE沉淀，离心，打浆洗涤，抽干。
第六步：取上一步产物，加DMF溶解，加HOBT和DIEA活化，冰浴下滴加DIC，滴加完成，撤去冰浴，恢复室温反应3h。反应结束，加入预冷MTBE沉淀，离心，打浆洗涤，抽干。
第七步：取上一步产物，加80%ACN水溶液溶解，加1mol/L的NaOH水溶液调PH至10，常温下搅拌反应2h；反应结束后，加冰醋酸调PH至3，旋蒸除去ACN，加入MTBE析出，离心，打浆洗涤，抽干。用35%ACN水溶液溶解，钛棒过滤后进行HPLC纯化。
纯度(HPLC) ≥98.0%
醋酸根含量≤12.0%
水分含量≤8.0%
肽含量≥80.0%
内毒素≤50EU/mg
氨基酸组成分析≤±10%
第二步：将第一步树脂投入反应柱中，加DCM溶胀，加20%PIP/DMF脱除Fmoc，DMF和DCM交替洗涤，用茚三酮检测，结果应呈阳性；DMF/DCM=3/1作为反应溶剂，加Fmoc-Trp(Boc)-OH、HOBT溶解后，加入DIEA，10~10℃条件下下加入HBTU活化10min；活化后转入反应柱中，常温下反应1h，用DMF和DCM洗涤，用茚三酮检测，结果应呈阴性；反应结束后，按照脱保护、洗涤、缩合循环进入下一步氨基酸的缩合，缩合的保护氨基酸依次为:Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-D-Phe-OH 、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH 、Fmoc-Nle-OH ；偶联完成后脱除N末端Fmoc保护基，加乙酰化试剂封端，甲醇收缩，抽干。
第三步：按1g树脂配置10ml全保护裂解液(1%~2%TFA/DCM或20%~30%TFE/DCM)，冰浴条件下加入树脂，开启搅拌；树脂完全加入后撤去冰浴，恢复室温反应1h。反应结束，过滤，树脂用DCM洗涤两次，合并滤液；向滤液中加入DIEA调溶液PH值至8-9，旋蒸拉干，加入预冷10%甲醇/水溶液沉淀，离心，打浆洗涤，抽干。
第四步：取上一步产物，加THF溶解，加入甲醇、三苯基膦溶解，通氮气保护，冰浴下滴加DEAD，滴加完成后，撤去冰浴，恢复室温反应4h。反应结束，旋蒸除去THF，加入MTBE析出，离心，打浆洗涤，抽干。
第五步：取上一步产物，按1g产品10ml的比例加入裂解液（TFA:Tis:H2O: 苯酚=92.5:2.5:2.5:2.5:2.5），室温反应1h。反应结束，加入预冷MTBE沉淀，离心，打浆洗涤，抽干。
第六步：取上一步产物，加DMF溶解，加HOBT和DIEA活化，冰浴下滴加DIC，滴加完成，撤去冰浴，恢复室温反应3h。反应结束，加入预冷MTBE沉淀，离心，打浆洗涤，抽干。
第七步：取上一步产物，加80%ACN水溶液溶解，加1mol/L的NaOH水溶液调PH至10，常温下搅拌反应2h；反应结束后，加冰醋酸调PH至3，旋蒸除去ACN，加入MTBE析出，离心，打浆洗涤，抽干。用35%ACN水溶液溶解，钛棒过滤后进行HPLC纯化。
多肽
醋酸布雷默浪丹(Bremelanotide)为环七肽结构。大量研究已证实它们的受体分子在性唤起、降低食欲以及催化黑色素的合成中起着重要的作用，由此可以治疗性功能障碍、肥胖以及刺激皮肤产生黑皮素抵抗紫外线灼伤等疾病。PT-141是美国Palatin公司开发的一种治疗性功能障碍的药物，目前已完成III期临床，对男女患者都有效，尤其是女性性冷淡患者唯一有效的候选药物。参考质量标准
外观:白色粉末纯度(HPLC) ≥98.0%
醋酸根含量≤12.0%
水分含量≤8.0%
肽含量≥80.0%
内毒素≤50EU/mg
氨基酸组成分析≤±10%