《细胞探险队》旅程更新！继T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴细胞系、单核-巨噬细胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）、NK细胞系（NK-92、NK-92MI、YT）、成纤维细胞系（3T3-L1、3T6-Swiss albino、NCTC、HFF-1）、神经肿瘤细胞系（SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44）、乳腺癌细胞系培养合集（MCF7、T-47D、MDA-MB-231、ZR-75-1）、肝癌细胞系培养合集（HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh-7）后，这次探索的是结肠癌细胞系！紧跟《细胞探险队》，开启细胞培养的奇妙之旅：覆盖上百种细胞系，积累干货经验和技巧，让细胞培养不再难
HCT116
01 名称
HCT116（人结肠癌肿瘤细胞）
02 别称
HCT-116; HCT.116; HCT_116
03 简介
HCT116细胞是1979年Brattain M等人从患结肠癌的男性病人中分离建系的3株细胞之一。该细胞在RAS原癌基因第13密码子上发生突变，并且在裸鼠中具有致瘤性。
04 种属
人
05 组织来源
结肠
06 生长特性
贴壁细胞
07 细胞形态
上皮细胞样
08 应用
肿瘤微环境互作机制解析；肿瘤侵袭、转移及上皮-间质转化（EMT）研究；结肠癌药物筛选以及波形蛋白中间丝动态研究
图片来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
09 培养条件
（1）完全培养基配方：McCoy's 5A（SH30270.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C；
（3）气相：5%CO2
10 换液频率
2-3次/周
11 传代周期
3-4天
12 传代比例
1:3-1:8；建议接种密度2×10⁴-4×10⁴个/cm²
13 冻存液配方
90%完全培养基+10%DMSO（abs9187）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14 注意事项
（1） HCT116为上皮样贴壁细胞，呈多边形，排列规则，若出现大量梭形细胞（可能发生 EMT）或大小不一的细胞（可能出现异质性增殖），需及时更换为冻存的早期代数细胞。
（2） HCT116细胞贴壁不牢固，轻微晃动培养瓶即可见大量圆形、透亮的细胞从瓶底脱落悬浮于培养液中。这是HCT116的正常现象，并非全部是死细胞。在换液或传代时，切勿将这些悬浮细胞全部弃去。
（3） HCT116使用McCoy's 5A基础培养基，但部分研究提及DMEM高糖培养基也可使用，但需遵循细胞株来源的推荐培养基类型，避免随意更换。
HT-29
01 名称
HT-29（人结肠癌细胞）
02 别称
HT 29; HT29
03 简介
HT-29细胞于1964年从一名患结直肠癌的44岁白人女性的原发肿瘤中分离获得。该细胞过表达p53 基因，且在 273 密码子处有 G->A 突变。此外，HT-29细胞可在裸鼠体内成瘤，也能在类固醇处理的地鼠成瘤。
04 种属
人
05 组织来源
结肠
06 生长特性
贴壁细胞
07 细胞形态
上皮细胞样
08 应用
肠道上皮分化与癌变关联研究、CRC 临床前药物研发的核心工具、肠道生理与病理模型构建（体外“肠模拟”）
图片来源于ATCC
09 培养条件
（1）完全培养基配方：McCoy's 5A（SH30270.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10 换液频率
2-3次/周
11 传代周期
3-4天
12 传代比例
1:3-1:8
13 冻存液配方
90%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14 注意事项
（1） HT-29细胞的基础培养基优先选用McCoy's 5A 培养基（最适合维持HT-29的高分化特性），不可随意替换为DMEM或RPMI 1640（易导致细胞分化状态改变、形态异常）。
（2） 当HT-29细胞融合度达到70%-80%左右就可进行传代，融合度过高会导致细胞分化加剧，出现空泡化；过低会影响增殖效率。
（3） HT-29细胞连接较紧密，需要比HCT116更充分的吹打才能形成单细胞悬液，但仍需避免暴力操作产生气泡。
（4） HT-29既是癌细胞，也是肠道上皮分化的模型。可根据您的实验目的决定培养策略：低汇合度维持增殖，高汇合度/诱导剂促进分化。
SW620
01 名称
SW620（人结肠腺癌细胞）
02 别称
SW-620; SW 620; SW.620
03 简介
SW620细胞是从一名 51 岁白人男性的大肠组织中分离出来的。该细胞主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成，仅合成少量癌胚抗原（CEA）且在裸鼠中有高度的致瘤性。
04 种属
人
05 组织来源
结肠，转移位置：淋巴结
06 生长特性
贴壁细胞
07 细胞形态
上皮细胞样
08 应用
结直肠癌转移相关基因/通路的筛选与验证、抗转移药物研发与耐药研究、体内转移模型构建与预后标志物验证
图片来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
09 培养条件
（1）完全培养基配方：Leibovitz's L-15（SH30525.01）＋10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）培养箱气体：100%空气
10 换液频率
2-3次/周
11 传代比例
1:2-1:10
12 冻存液配方
95%完全培养基 +5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
13 注意事项
（1） SW620基础培养基为 Leibovitz's L-15， 需在37℃、100% 空气（无 CO₂）的饱和湿度培养箱中培养，严禁通入CO₂空气混合气体，CO₂会破坏培养基的pH，导致 pH 值骤降（＜6.8），24小时内即可引发细胞皱缩、贴壁能力下降甚至死亡。
（2） SW620细胞贴壁能力较强，因此消化时间较长，在显微镜下看到细胞间隙增大，大部分细胞变圆、部分开始脱落时，即可终止消化。此外，SW620细胞悬浮较少，如果在换液时看到大量悬浮细胞，则细胞状态不佳或存在污染。
（3） 由于SW620细胞连接紧密、贴壁牢固，解离时需要更用力地吹打细胞表面，才能将其完全吹散成单细胞悬液，但需避免产生过多气泡。
LoVo
01 名称
LoVo（人结肠癌细胞）
02 别称
LOVO
03 简介
LoVo细胞于1971年建系，来源于一名56岁白人男性结直肠癌患者的左锁骨上区肿瘤转移灶。该细胞肿瘤基因C-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos表达阳性，且表达肿瘤特定的核基质蛋白CC-3和CC-4，可在裸鼠体中成瘤。
04 种属
人
05 组织来源
结肠，转移位置：左锁骨上区
06 生长特性
贴壁生长
07 细胞形态
上皮样细胞
08 应用
探索联合治疗策略、免疫逃逸机制研究、筛选早期诊断标志物、药物敏感性及耐药机制研究
图片来源于ATCC
09 培养条件
（1）完全培养基配方：Ham‘s F-12K（abs9563）＋10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO₂ ：5%
10 换液频率
2-3次/周
11 传代比例
1:3-1:10
12 冻存液配方
95% 完全培养基+5% DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
13 注意事项
（1）LoVo细胞同时以贴壁和悬浮单细胞/团块两种形式存在，这是LoVo细胞的固有特性，而非培养不当或污染的表现，任何操作都必须同时兼顾这两部分细胞。
（2）贴壁生长的LoVo细胞并非均匀的单层细胞，而是形成三维的、贴壁不牢固的细胞“集落”，这些“集落”很容易在晃动或吹打时脱落变为悬浮状态。
（3）LoVo细胞消化时，在显微镜下观察，当贴壁细胞集落变得松散、有脱离表面的趋势时即可终止。不需要消化成完全的单细胞，保持小团块状态更利于其生长。
参考资料:
ATCC官网
中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库