亚铁氧化酶(HP)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
Hephaestin (HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白亚铁氧化酶,HP 属亚铁氧化酶家族成员,具有亚铁氧化酶的活性,参与体内铁代谢。HP 的表达可受铁、铜及锌等金属离子的调节。HP 催化 Fe2+氧化生成 Fe3+,在介导铁的跨膜转运中有重要作用。
测定原理:
HP 催化 Fe2+氧化为 Fe3+ ,Fe2+和 ferrozine 反应显色,在 560 nm 下有特征吸光值。通过测定 Fe2+ 的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:
在玻璃比色皿中加入下列试剂
试剂名称(μL)
测定管
对照管
试剂一
250
试剂二
50
样本
蒸馏水
150
试剂三
混匀,40℃静置 30 min
500
混匀,立即测定 A 对照和 A 测定,ΔA=A 对照-A 测定。(每个测定管需设一个对照管)
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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