线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH辅酶Q还原酶测定试剂盒/分光光度法/24样 新品

线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH辅酶Q还原酶测定试剂盒/分光光度法/24样

测定意义：

复合体 Ⅰ（EC 1.6.5. 3）又称 NADH-CoQ  还原酶或 NADH 脱氢酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。该酶催化一对电子从 NADH 传递给 CoQ ，同时可使 O2 还原生成 O2.- ，是呼吸电子传递链上产生 O2.-的主要部位。测定该酶活性，不仅可以反映呼吸电子传递链（ETC）状态，而且可以反映活性氧（ROS）生成状态。

测定原理：

复合体Ⅰ能够催化 NADH 脱氢生成 NAD+ ，在 340nm 下测定 NADH 的氧化速率计算出该酶活性的大小。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

测定步骤：

1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2、 样本测定

（1）工作液于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min。

（2）在 1mL 石英比色皿中加入 40μL 样本、800μL 工作液和60μL 试剂六，立即混匀，记录 340nm 处初始吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2 ，计算 ΔA=A1-A2。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。