检验原理:
H5N6 亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测 H5N6 禽流感病毒核酸的诊断工具。该试剂盒主要针对 H5N6 病毒的血凝素(HA)基因或神经氨酸酶(NA)基因设计,利用实时荧光 PCR 技术,对临床样本或环境样本中是否存在 H5N6 病毒进行快速、高灵敏度的筛查和鉴定。
产品名称 | H5N6 亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3016 |
�� 试剂盒核心原理
该试剂盒通常基于 TaqMan 荧光探针法(实时荧光定量 RT-PCR)原理:
反转录(RT):试剂盒中含有反转录酶,能将样本中的病毒 RNA 逆转录为互补 DNA(cDNA)。
PCR 扩增:针对 H5N6 病毒的特异性基因片段(如 H5 基因或 N6 基因)设计特异性引物和 TaqMan 探针。在 PCR 反应过程中,引物和探针会特异性结合到目标 cDNA 上。
荧光检测:在扩增过程中,探针会被 Taq 酶降解,释放出荧光基团。仪器实时监测荧光信号的累积。
结果判定:若样本中存在 H5N6 病毒核酸,荧光信号会随循环数增加而指数级增长,当信号强度超过设定阈值(Ct 值)时,判定为阳性;反之则为阴性。
�� 典型产品参数
参数项 典型指标/说明
通用名称 H5N6 亚型禽流感病毒核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
检测靶标 H5N6 禽流感病毒 H5 基因或 N6 基因
检测方法 一步法实时荧光 RT-PCR (Real-Time RT-PCR)
产品规格 20T/盒、25T/盒 或 50T/盒
最低检测限 通常为 10³ 拷贝/mL 或 0.04 TCID₅₀
样本类型 咽拭子、鼻拭子、痰液、肺泡灌洗液、禽类泄殖腔拭子等
适用仪器 ABI 7500、LightCycler 480、Roche 480 等荧光 PCR 仪
储存条件 -20℃ ± 5℃ 避光保存
组成成分(以常见配置为例)
PCR 反应液:包含 PCR 缓冲液、dNTPs、Mg²⁺。
酶混合物:包含反转录酶和 DNA 聚合酶(通常为 Taq 酶)。
引物与探针:针对 H5N6 病毒特异性基因片段的特异性引物和荧光标记探针。
阳性对照:含有目的基因片段的质粒或灭活病毒,用于验证试剂盒有效性。
阴性对照:无核酸酶水或缓冲液,用于监控污染情况。
内标(部分试剂盒包含):用于监控提取和扩增过程是否正常,防止假阴性。
�� 结果判读标准
阳性(+):
样本孔扩增曲线呈典型 S 型,且 Ct 值 ≤ 40(具体阈值视说明书而定)。
提示样本中检测到 H5N6 病毒核酸。
阴性(-):
无扩增曲线,或 Ct 值 > 40(或显示为 Undetermined)。
提示样本中未检测到 H5N6 病毒核酸(或低于检测限)。
无效:
阳性对照未检出,或阴性对照出现扩增,提示实验失败或存在污染,需重做。
⚠️ 注意事项与局限性
假阴性风险:如果样本采集时间过晚(发病超过 7 天)、采样部位不当或样本运输保存不当(反复冻融或未冷链),可能导致病毒 RNA 降解,出现假阴性。
生物安全:H5N6 病毒属于高致病性病原微生物,样本的采集、运输和处理必须在符合生物安全二级(BSL-2)或更高级别的实验室中进行,并采取严格的个人防护措施。
临床诊断:核酸检测结果仅为临床诊断提供参考依据,不能作为唯一确诊标准。确诊需结合流行病学史、临床症状及其他实验室检查(如病毒分离、血清学抗体检测)综合判断。
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小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)PCR检测试剂盒 | 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)PCR检测试剂盒免费代测 |
注意事项:1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融^[历史回答]^。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性^[历史回答]^。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃^[历史回答
关键字: H5N6 亚型;禽流感病毒;检测试剂盒;
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