超氧化物歧化酶

SOD（超氧化物歧化酶）SOD是一系列酶的总称，是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。能够有效遏制自由基，俘获自由基，分解自由基，力度大，靶向准，是唯一以自由基为底物的清除酶。

超氧化物歧化酶能够清除超氧化物，保护细胞免受氧化损伤。超氧化物与非自由基的反应是自旋禁阻的。在生物学系统中，这就意味着它主要是与自身（歧化）或另一个生物学自由基（如一氧化氮）反应。超氧化物阴离子自由基（O2−）能够较快地（在pH=7时，反应速度为~105 M−1 s−1）歧化为O2和过氧化氢（H2O2）。但超氧化物能够与特定的分子（如NO自由基）以更快的速度反应，生成过氧亚硝酸根离子（O=N-O-O−），因此超氧化物歧化酶的催化作用就显得尤为重要。而且，超氧化物的歧化反应与其初始浓度的平方相关，因此虽然高浓度的超氧化物半衰期很短（比如0.1mM浓度下为0.05秒），但低浓度的超氧化物的半衰期相当长（0.1nM浓度下可达14小时）。

超氧化物歧化酶有强大的抗炎作用，临床用于类风湿关节炎、骨关节病、放射性膀胱炎，可以清除体内过量的自由基，提高人体免疫力，延缓衰老；抗疲劳，调节女性生理周期，推迟更年期。

超氧化物歧化酶的主要作用是能专一清除体内的超氧阴离子O^-₂,以解除氧阴离子氧化体内的成分造成对机体的损害。
其半衰期短，通常仅有6～10min。相对分子质量大，不易透过细胞膜、口服易受蛋白不解酶作用而失活。所以临床应用受到限制。该酶系一种酸性蛋白质，较稳定，能耐热。Ph7.6～9时稳定，ph6以下和12h以上不稳定。特别是在ph2以下极度不稳定。具有较强的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶水解的能力。
无免疫调节及镇痛作用，也不影响前列腺素等炎症介质的合成。超氧化物歧化酶制剂临床主要用于治疗全身性红斑狼疮、皮肤炎、硬皮病、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、血小板减少等自身免疫性疾病，治疗心肌缺血与缺血再灌注综合征。也可用于断肢再植、整形、美容及肾、肝、心脏等器官的保护和移植等手术过程。但糖尿病、肝炎、尿毒症患者忌用。不能与酸性或碱性药物，含醇制剂、金属盐和抗生素类药物配伍。
肌注，一次8mg,每周2～4次；关节腔内注射，一次4mg，每2周1次；放射性后遗症，深部肌注，一次4mg，放疗后半小时注射。用于生化研究，临床上常用作治疗全身性红斑狼疮、皮肌炎、类风湿性关节炎、硬皮病、自身免疫性溶血性贫血、血小板减少症等自身免疫性疾病，治疗某些心血管疾病，用于防衰老。本品为修饰SOD冻干粉，更稳定。广泛用于化妆品,保健食品中,清除自由基,抗氧化,延缓衰老。以牛红血球为原料，洗涤后分离去除血红蛋白，再经柱层析、透析精制得产品。收集、乳洗取新鲜猪血，离心，除去黄色血浆，红细胞用氯化钠溶液（9g/L即0.9%）离心洗浮，除去洗浮液，反复清洗3次，得干净红细胞。
新鲜猪血^{离心除血浆}→_收集红血球^NaCl洗3次→_洗浮干净红血球
溶血、去血红蛋白在温度5⁰C下，于干净红细胞中加入去离子水，搅拌30min，然后在每100ml红细胞溶液中加入25ml乙醇（95%）和15ml氯仿，搅拌15min，离心去血红蛋白，收集上清液。
干净红血球^{去离子水；50;30min}→_{溶血}溶血物
^{乙醇；氯仿}→去血红蛋白上清液
沉淀、热处理在0⁰C左右，于上清液中加入1.2～1.5倍体积的丙酮，待大量絮状沉淀产生后，离心，除去上清液，得沉淀物。沉淀物加适量去离子水使其溶解，离心，除去不溶性蛋白，上清液在55～65⁰C热处理10～15min,离心，除去大量热变性蛋白，收集黄绿色的上清液。
上清液^丙酮；00→沉淀沉淀^{去离子水;600}→热处理黄绿色澄清液
沉淀、去不溶蛋白、透析在0⁰C将加入适量丙酮于上清液中，使其产生大量絮状沉淀，离心，除去上清液，收集沉淀，加去离子水充分搅拌使其溶解，离心除去不溶性蛋白，清液置透析袋中动态透析6～8h，得透析液。
黄绿色澄清液^{丙酮；去离子水;00}→沉淀；去不溶蛋白；透析透析液
吸附、洗脱、浓缩、冻干将透析液加到已用ph7.6磷酸缓冲液(2.5mmol/L)平衡好的DEAE-Sephadex A-50色谱柱上吸附，用ph7.6的磷酸钾缓冲液（2.5～50mmol/L）进行梯度洗脱，收集肯有超氧化物歧化酶活力的洗脱液，超滤，浓缩，冷冻干燥，即是超氧化物歧化酶成品
透析液^{DEAE-Sephadex A-50;磷酸钾缓冲液；Ph7.6}→^吸附、洗脱、超滤；浓缩、冻干}成品
电泳鉴定条件用琼脂糖凝胶（5g/L即0.5g）平板电泳，用ph8.4三羟甲基氨基甲烷-甘氨酸为缓冲液，电压梯度22V/cm，电流3mA/cm，电泳时间35min，固定染色液5g/L（0.5%）氨基黑10B，脱色液为7g/L(7%)乙酸。