Aliz-gal琼脂的应用研究

2020/3/5 18:18:45

背景[1-3]

liz-gal琼脂用于食品,饮料和饮用水的大肠菌群快速检验和计数。Aliz-gal琼脂中胰蛋白胨提供碳源和氮源满足大肠菌群生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶,分解培养基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使茜素游离,并与培养基中的铝、钾、铁、铵离子结合形成紫色(或红色)的螯合物,使菌落呈现相应的颜色。

大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胚杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。大肠菌群主要包括畅杆菌科中韵埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、魔雷伯氏菌属和肠杆菌属。这些属的细菌均来自于人和温血动物的肠道,需氧与兼性厌氧,不形成芽孢;在35~37℃条件下,48小时内能发酵乳糖声酸产气,革兰氏阴性。大肠菌群中以埃希氏菌属为主,埃希氏菌属教俗称为典型大肠杆菌。大肠菌群都是直接或间接地来自人和温血动物的粪便。本群中典型大肠杆菌以外的菌属,除直接来自粪便外,也可能来自典型大肠杆菌排出体外7~30天后在环境中的变异。所以食品中检出大肠菌群J表示食品受动人寝温血动物的粪便污染,其中典型大肠杆菌为粪便近期污染,其他菌属则可能为粪便的陈旧污染。

应用[4][5]

用于大肠菌群快速检测方法的研究

大肠菌群被定义为一群在37℃、24h能够发酵乳糖、产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢的小杆菌。如果在食品中检测到大肠菌群的存在,则说明食品受到了人和温血动物的粪便的污染。如果检测到大肠菌群呈阳性结果,那么便表明该食品已经被粪便污染。大肠菌群的数量与食品受到的污染程度呈成正比,同时,食品受肠道致病菌的入侵的程度也与大肠菌群的数量成正比。因此检测大肠菌群已经成为对食品的卫生质量进行评估必不可少的一个环节。目前,检测大肠菌群的方法有很多,培养法包括试管发酵法、平板法、膜过滤法、试纸片法等;现代发展的方法有酶化学法、生物发光法、分子生物学法和免疫学法等。将大肠菌群试管发酵法和还原法相结合,首先将大肠菌群大量增菌,在代谢过程中能够产生大量氧化还原酶,特定的指示剂与氧化还原酶反应,指示剂的颜色由蓝色变为紫色、粉色直至无色。根据颜色的变化利用光电测色仪对大肠菌群数量进行判定,建立一种新的方法。

参考文献

[1]Evaluation of dry medium(Sanita-Kun)for enumeration of coliforms and Escherichia coli in milk,ice cream,ham,and codfish fillet[J].Jung Hyun Park,Xin Yue Wang,Jong Suk Lee,Myunghee Kim.Food Science and Biotechnology.2012(6)

[2]An advanced PCR method for the specific detection of viable total coliform bacteria in pasteurized milk[J].Takashi Soejima,Jun-ichi Minami,Tomoko Yaeshima,Keiji Iwatsuki.Applied Microbiology and Biotechnology.2012(2)

[3]A rapid method for the detection of representative coliforms in water samples:polymerase chain reaction-enzyme-linked immunosorbent assay(PCR-ELISA)[J].Jong-Tar Kuo,Chiu-Yu Cheng,Hsiao-Han Huang,Chia-Fen Tsao,Ying-Chien Chung.Journal of Industrial Microbiology&Biotechnology.2010(3)

[4]Sensitive and rapid chemiluminescence enzyme immunoassay for microcystin-LR in water samples[J].F.Long,H.C.Shi,M.He,J.W.Sheng,J.F.Wang.Analytica Chimica Acta.2009(1)

[5]吕肖楠.大肠菌群快速检测方法的研究[D].东北农业大学,2014.

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