背景[1-3]
2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶抗体是一类可以特异性结合2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶的多克隆抗体。角鲨烯是一种在人体胆固醇合成等代谢过程中产生的多不饱和烃类,含有6个异戊二烯双键,属于萜类化合物,很多食物中含有角鲨烯,其中鲨鱼肝油中含量较高,在橄榄油和米糠油等少数几种植物油中角鲨烯含量也相对较高。

2,3-环氧角鲨烯羊毛固醇环化酶抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,最终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一种抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。多克隆抗体由于其可识别多个抗原表位、可引起沉淀反应,制备时间短,成本低的原因广泛应用于研究和诊断方面。
应用[4][5]
用于人参2,3-氧化角鲨烯代谢途径中关键酶的表达调控研究
人参的主要药理活性成分为人参皂苷。研究表明,人参皂苷合成的前体物质为2,3-氧化角鲨烯,其主要代谢流向有两条,一条为合成皂苷类物质代谢途径(达玛烷型皂苷(dammarane-type ginsenosides),齐墩果烷型皂苷(oleanane-typeginsenosides);另外一条是合成植物甾醇类物质,分别流向羊毛甾醇和环阿乔醇。在已报道的流向人参皂苷和植物甾醇两条支路中,达玛烯二醇合成酶(DS)是控制2,3-氧化角鲨烯流向人参皂苷合成途径的关键酶;环阿乔醇合成酶(CAS)控制2,3-氧化角鲨烯流向植物甾醇合成途径,本研究发现,在2,3-氧化角鲨烯流向植物甾醇合成途径中存在另一个关键酶——羊毛固醇合成酶(LAS),即羊毛固醇合成酶(LAS)和环阿乔醇合成酶(CAS)共同控制2,3-氧化角鲨烯流向植物甾醇合成途径。由于人参栽培周期长,具有连作障碍,且容易受到病虫害干扰的缺点,本研究建立生长快速的人参发根无菌MS培养体系,并对人参发根提取物进行HPLC定量分析。
本研究通过RNA干扰技术分别调控人参发根中LAS、CAS和DS的表达,对人参皂苷生物合成途径中的关键酶基因LAS、CAS和DS进行功能鉴定,并在分子水平上调控人参皂苷的代谢途径,进而实现提高人参皂苷的含量。
参考文献
[1]Regulation of ginsenoside and phytosterol biosynthesis by RNA interferences of squalene epoxidase gene in Panax ginseng[J].Jung-Yeon Han,Jun-Gyo In,Yong-Soo Kwon,Yong-Eui Choi.Phytochemistry.2009(1)
[2]Cloning and characterisation of a prenyltransferase from the aphid Myzus persicae with potential involvement in alarm pheromone biosynthesis[J].M.J.Lewis,I.M.Prosser,A.Mohib,L.M.Field.Insect Molecular Biology.2008(4)
[3]Progress in understanding of ginsenoside biosynthesis[J].Y.Liang,S.Zhao.Plant Biology.2008(4)
[4]Combined effects of phytohormone,indole-3-butyric acid,and methyl jasmonate on root growth and ginsenoside production in adventitious root cultures of Panax ginseng C.A.Meyer[J].Yun-Soo Kim,Edward C.Yeung,Eun-Joo Hahn,Kee-Yoeup Paek.Biotechnology Letters.2007(11)
[5]金士琨.人参2,3-氧化角鲨烯代谢途径中关键酶的表达调控研究[D].吉林大学,2014.