背景[1-3]
人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人巨噬细胞趋化因子(MCF)水平。用纯化的人巨噬细胞趋化因子(MCF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入巨噬细胞趋化因子(MCF)，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的巨噬细胞趋化因子(MCF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人巨噬细胞趋化因子(MCF)含量。计算方式：用标准浓度为横坐标，OD为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，根据样品通过标准曲线被发现对应浓度;乘以稀释系数;或标准浓度进行计算以标准曲线的线性回归方程，样品OD入方程，计算出的样品浓度，再乘以稀释因子，即实际样品浓度。
趋化因子(chemokines)：是一类由细胞分泌的小细胞因子或信号蛋白。由于它们具有诱导附近反应细胞定向趋化的能力，因而命名为趋化细胞因子。趋化因子的主要作用是诱导细胞定向迁移，被趋化因子吸引的细胞沿着趋化因子浓度增加的信号向趋化因子源处的迁徙。有些趋化因子在免疫监视过程中控制免疫细胞趋化，如诱导淋巴细胞到淋巴结，这些淋巴结中的趋化因子通过与这些组织中的抗原提呈细胞相互作用而监视病原体的入侵。这些被称为稳态趋化因子，在不需要刺激源细胞的情况下产生和分泌。有些趋化因子在发育中起作用；他们能刺激新血管形成（血管新生）；引导细胞进入组织，为细胞的成熟提供特定的信号。其他趋化因子在炎症反应中其关键作用，可以因应对细菌感染、病毒感染由多种细胞释放；也可以因非感染性的刺激如二氧化硅吸入，尿路结石等而释放。趋化因子的释放通常由炎症细胞因子如白细胞介素1(IL-1)刺激引起。炎性趋化因子的主要作用是作为白细胞的趋化剂，从血液中吸引单核细胞、中性粒细胞和其他效应细胞到感染或组织损伤的部位。某些炎性趋化因子可激活细胞来启动免疫反应或促进伤口愈合。它们由许多不同的细胞类型释放，并对天然免疫系统和适应性免疫系统的细胞起引导作用。
应用[4][5]
用于二甲双胍对LPS诱导的巨噬细胞趋化因子表达的调节及其机制的探讨研究
炎症反应参与多种疾病的发生发展,包括自身免疫性疾病、糖尿病、心血管疾病、肿瘤等。免疫细胞的招募和活化在炎症反应中发挥重要作用,巨噬细胞作为抵御外界刺激的道防线,是机体固有免疫的重要组成细胞。巨噬细胞激活后分泌大量趋化因子,趋化因子表达和功能异常与自身免疫性疾病、感染性疾病、糖尿病和肿瘤等炎症相关疾病密切相关。其中CC类和CXC类趋化因子是最主要的趋化因子家族,在调节炎症细胞和免疫细胞趋化迁移中发挥关键作用。大量研究表明临床上治疗糖尿病的常用药AMPK激活剂二甲双胍,具有明显的不依赖于降糖作用的抗炎效应,并且活化AMPK可以抑制NF-κB信号通路从而下调TNF-α等炎症因子。
参考文献
[1]Emodin suppresses LPS-induced inflammation in RAW264.7 cells through A PPARγ-dependent pathway[J].Tao Zhu,Wei Zhang,She-jun Feng,Hua-peng Yu.International Immunopharmacology.2016
[2]Involvement of AMPK,IKβα-NFκB and eNOS in the sildenafil anti-inflammatory mechanism in a demyelination model[J].Ana Karolina Santana Nunes,Catarina Rap?so,Sura Wanessa Santos Rocha,Karla Patrícia de Sousa Barbosa,Rayana Leal de Almeida Luna,Maria Alice da Cruz-H?fling,Christina Alves Peixoto.Brain Research.2015
[3]Metformin decreases IL‐22 secretion to suppress tumor growth in an orthotopic mouse model of hepatocellular carcinoma[J].Dong Zhao,Xi‐Dai Long,Tian‐Fei Lu,Tao Wang,Wei‐Wei Zhang,Yi‐Xiao Liu,Xiao‐Lan Cui,Hui‐Juan Dai,Feng Xue,Qiang Xia.Int.J.Cancer.2015(11)
[4]Metformin,an Old Drug,Brings a New Era to Cancer Therapy[J].Huan He,Rong Ke,Hui Lin,Ying Ying,Dan Liu,Zhijun Luo.The Cancer Journal.2015(2)
[5]朱娜.二甲双胍对LPS诱导的巨噬细胞趋化因子表达的调节及其机制的探讨[D].南昌大学,2016.