背景及概述[1]
琼脂糖由D-半乳糖和3,6-内醚-L-半乳糖构成的链状中性多糖，结构单元中含有羟基官能团，易于与结构单元中的氢原子和链段周围水分子形成氢键。在低温时，琼脂糖糖链依靠氢键作用，以双螺旋方式相互缠绕，形成双螺旋结构，紧密排列，形成凝胶，呈白色浑浊；在高温时，结构单元中的氢键被破坏，以无规线团分散在水中，溶液澄清透明，是一种具有特殊温度响应性的聚合物。
修饰方法[1]
在自然界分离出的琼脂糖具有较高的相转变温度，限制了琼脂糖在生物医学和其他领域中的应用。根据琼脂糖温度响应机制，改变琼脂糖结构单元内/外及与结构单元周围的水分子形成的氢键相互作用，调节琼脂糖双螺旋结构的形成，可有效地降低其相转变温度，提高琼脂糖使用性能。
一种琼脂糖的修饰方法，该方法为：
将0.1g低熔点琼脂糖和100mL去离子水加入至圆底烧瓶中，加热，使琼脂糖充分溶解。冷却至50℃，加入0.5g氢氧化钠(NaOH)和1.6mL环氧氯丙烷，在30℃下反应2h，加入5mL含0.025g的甲氧基聚乙二醇胺(mPEG-NH2)(分子量为20k)去离子水，其中，琼脂糖与甲氧基聚乙二醇胺质量比为1:0.25；在30℃下反应72h后，将反应液转入透析袋，透析袋的截留分子量为50k，透析3天，每12h换一次水，冻干。本实施例制备而得的聚合物为：Agarose-g-PEG20k-1。
本方法通过碱化反应和亲核取代反应，在低熔点的琼脂糖水溶液中加入氢氧化钠和环氧氯丙烷30℃下反应2h，加入不同质量的甲氧基聚乙二醇胺，30℃下反应72h，经透析和冻干后，制备得到琼脂糖-接枝-聚乙二醇单甲醚聚合物(Agarose-g-mPEG)。该方法可破坏琼脂糖双螺旋结构形成，降低琼脂糖相转变温度，降低人体对药物的免疫反应，方法简单，反应条件温和，处理方便，便于推广。而且，根据PEG反应比例，有效地调节琼脂糖相转变温度。
低凝固温度琼脂糖的制备[2]
一种低凝固温度琼脂糖的制备方法，包括如下步骤：
(1)将4.0g琼脂糖粉末于90℃下溶于150mL去离子水中，配制成琼脂糖溶液；
(2)上述琼脂糖溶液自然冷却至82℃后，向其中加入0.9mL硼氢化钠的氢氧化钠溶液进行还原反应15min，反应过程中观察溶液的颜色变化，当颜色由浅绿色变为无色透明液体时，终止还原反应，硼氢化钠的氢氧化钠溶液中，硼氢化钠的浓度为4.4mol/L，溶剂为10.0～20.0mol/LNaOH溶液；
(3)向步骤(2)所得溶液中加入40mL浓度为3.8mol/L的氢氧化钠溶液进行碱化处理；
(4)将步骤(3)的溶液迅速冷却至5℃，边搅拌边于60min内缓慢滴加20～60％(v/v)环氧乙烷水溶液至环氧乙烷在溶液中的浓度为1.0～5.0wt％，再搅拌反应60min；
(5)将步骤(4)所得的溶液加热至70℃，边搅拌边滴加3.0mol/L的乙酸溶液调节溶液的pH值至7.2；
(6)边搅拌边将45℃的热异丙醇加入到步骤(5)的溶液中，然后静置1.0～3.0h进行醇沉分级；
(7)将步骤(6)所得的物料经离心过滤，得到白色沉淀物，用60％体积浓度的异丙醇浸没后进行粉碎，再以异丙醇洗涤4次，压榨脱水得滤饼；
(8)将上述滤饼置于55℃的空气干燥箱中恒温干燥12.0h后，再粉碎、200目筛网过筛，即得所述低凝固温度的琼脂糖，该琼脂糖的熔化温度为60.0℃，凝固温度26.5℃，凝胶强度为265g/cm2。
琼脂糖凝胶微球的制备[3]
一种琼脂糖凝胶微球及其制备方法如下：
称取40g琼脂糖固体，加入1000mL超纯水，混合均匀，制得琼脂糖溶液，然后缓慢加入NaBH40.0004g，再持续用泵以0.5mL/min的流速加入20wt%的NaOH溶液，机械搅拌混匀，搅拌转速为80rpm；在搅拌条件下，持续用泵以0.3mL/min的流速加入环氧氯丙烷，在50℃下反应1h，反应至0.3h时逐步将环氧氯丙烷加入的流速调小至0.03mL/min，将NaOH溶液加入流速调小至0.05mL/min；再用泵以0.01mL/min的流速向溶液中加入10wt%硫酸酐溶液，并停止加入环氧氯丙烷与NaOH溶液，55℃下反应1h；将所得溶液用4040超滤膜过滤、浓缩后干燥，制得硫酸酐琼脂糖。
采用粒径均一的琼脂糖凝胶微球生产系统，将所得硫酸酐琼脂糖制备成微球，其具体是将所得硫酸酐琼脂糖配制成水溶液，通过胶磨机进行处理后，再经微波加热釜充分溶解形成胶液；同时将油相经预混加热釜混合加热，再经超声均一消泡釜进行均质预乳化消泡处理后形成无泡油相；随后将无泡油相与胶液输送到超声波均质釜进行混合，然后将混合液输送到油水分离器，将分离得到的水相输入微球清洗器进行清洗后，将洗净的微球进行混匀、包装。所得琼脂糖凝胶微球中氨基葡萄糖基含量为3.05mmol/g。
参考文献
[1][中国发明]CN201811343905.3一种琼脂糖的修饰方法
[2][中国发明,中国发明授权]CN201610044453.3一种低凝固温度琼脂糖的制备方法
[3][中国发明]CN201810513220.2一种琼脂糖凝胶微球及其制备方法