组培中琼脂粉不凝固或偏软?该怎么办?

2024/2/23 14:19:17 作者:云霄

琼脂粉又称寒天粉,果冻粉。它是提取自天然石花菜、江蓠菜、紫菜,采用科学方法精炼提纯的天然高分子多糖物质。粉末状,可以直接冲茶或加入果汁中喝,比较方便。口感和它的使用量有关,用量越多,呈现出脆硬的口感,用量少,口软较柔软嫩滑。此外,在生物实验中也常常用琼脂粉来配培养基,有时会发现琼脂粉不凝固或偏软,本文将简要分析可能的原因。

琼脂粉

琼脂粉不凝固

1. 组培室刚运营的时候,工作人员经验不足,琼脂粉忘加了。

2. 琼脂添加的量算错了,少加了。

3. pH误差较大,差1以上; 忘记调节pH。这种情况很容易造成培养基出现不凝固,偏软的现象。平常pH计也会因为各种原因出现偏差,所以需要定期校准。

琼脂粉偏软

1. 琼脂粉用量问题

琼脂用量的差异主要出现在不同强度和不同批次的琼脂粉上,所以每次更换琼脂必须要做好测试工作。

2. pH问题

平时要多留心在正常情况下,灭菌后的培养基pH值与所调节的pH值相比下降了多少。例如冬天一般会下降0.2-0.3个pH,夏天则会下降0.3-0.4,不同灭菌锅之间也会有差异。

一旦培养基出现问题,我们最关心的是灭菌后的培养基pH值。所以组培室如果配的培养基凝固的不好,第一时间会校准pH计,再测量那些有问题的。

通过校准pH计,检查仪器是否准确。大多数情况下仪器会有偏差,这是导致培养基凝固不好的一个原因。

3. 琼脂过度水解问题

pH计没问题,再测量偏软培养基的pH值。绝大部分会pH偏低。琼脂的水解比例加大,有效琼脂粉含量下降,导致凝固性能下降。甚至有时候排冷气的时间加长,或者灭菌结束后闷在锅里一段时间,或者灭菌后的培养基放在太热的空调房里,冷凝时间加长等等,都会造成琼脂的水解。

在同等pH和灭菌条件下,部分琼脂会水解的厉害一些,前后会下降0.4-0.5个pH,针对这类琼脂,需要在调节pH时比平时高0.2左右,灭菌出来的pH就会跟平常所灭的培养基一样,凝固也会好很多。

还有一种情况会造成琼脂粉损失,培养基加热过程中搅拌不到位,粘锅了,致使培养基颜色加深,往往凝固也不好。

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