简介
恩格列净杂质07（EPLZ-X）为磺酸酯类衍生物，是恩格列净合成过程中产生的潜在基因毒杂质。其分子骨架保留恩格列净的D-葡萄糖醇和氯苯并呋喃片段，但在苯环3-位羟基上形成甲磺酸酯或类似磺酸酯结构，使其具有潜在烷基化活性，被归为"警示结构"杂质[1]。
恩格列净杂质07的性状
合成
将乙腈（500 mL）加入到AlCl3 （118.0 g, 0.890 mol）的CH2Cl2（350 mL）浆液中，在0-5°C下，保持内部温度≤20°C，30分钟，然后加入Et3SiH（88.9 g, 0.765 mol）。将(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-三（烯丙氧基）-6-（（烯丙氧基）甲基）-2-（4-氯-3-（4-（(S)-四氢呋喃-3-基）氧苄基）苯基）-2-甲氧基四氢- 2h -吡喃（204 g）溶液加入上述溶液15分钟。在20-25°C的温度下搅拌半小时。将混合物冷却至0-5°C。缓慢加水（1000 mL）使混合物淬灭。浓缩反应混合物，去除有机溶剂。向反应混合物中加入IPAc（1000 mL）。再次浓缩混合物以除去有机溶剂。在残留物中加入IPAc（750 mL）。将混合物加热至45°C 30分钟。当冷却到18-22℃时，产品逐渐结晶。在18-22°C的温度下再搅拌5小时。通过过滤收集固体。用IPAc（100ml）清洗固体。在烤箱中烘干固体得到标题化合物恩格列净杂质07[2]。
含量测定
采用 LC-MS/MS正离子多反应监测模式（m/z 785→475 和 785→418），在乙腈-水（75:25）流动相、0.7 mL/min流速下测定，恩格列净杂质07在0.5–100.6 ng/mL范围内线性良好（r²≥0.9976），定量下限0.5 ng/mL，日内/日间精密度≤11.8 %，回收率102.6 %–109.8 %；3批原料药实测含量0.065–0.094 ppm，均远低于EMEA 60 ppm限度，方法专属灵敏，可用于商业化批次放行[1]。
毒性
欧洲药品管理局（EMEA）基因毒杂质指导原则将磺酸酯类列为潜在致突变物，恩格列净杂质07因此需严格控制。按最大日剂量25 mg计算，其日暴露量不得超过1.5 µg，折算为原料药中限度为60×10⁻⁶（60 ppm），为本研究设定"不得超过"的唯一杂质定量标准[1]。
参考文献
[1]周浩,孟繁华,孙磊,等. LC-MS/MS法定量检测恩格列净原料药中杂质的含量 [J]. 国际药学研究杂志, 2016, 43 (04): 753-756. DOI:10.13220/j.cnki.jipr.2016.04.032.
[2] Efficient Synthesis of Empagliflozin, an Inhibitor of SGLT-2, Utilizing an AlCl3-Promoted Silane Reduction of a β-Glycopyranoside. By: Wang, Xiao-jun; et al. Organic Letters (2014), 16(16), 4090-4093.