野黄芩素的提取与纯化

2025/11/4 10:27:54 作者:火星人

野黄芩素为4’,5,6,7-四羟基黄酮,其7-O-β- 葡萄糖醛酸苷为野黄芩苷。野黄芩苷具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、改善心脑缺血、神经保护等多种药理作用,但其口服生物利用度低、体内半衰期短。而野黄芩素具有更强的生物活性、口服易于吸收,与野黄芩苷相比,其相对生物利用度为301.8%,具有更好的药用价值。野黄芩素在植物中的含有量很低,难以从相关植物中大量提取。目前野黄芩素主要采用化学合成和酸水解等方法制备,但多存在使用有毒溶剂、副产物多、高温、操作复杂、成本高等缺点,因此亟需寻找新的野黄芩素制备途径。

野黄芩素

提取与纯化[1]

提取:煎煮次数、加水量、煎煮时间为影响提取的主要因素,采用4因素3水平进行正交试验研究,优选最佳煎煮条件。经试验确定灯盏花提取工艺为:灯盏花切段,加10倍水(第1次多加5倍)提取2次,每次1h,滤过,合并滤液,得灯盏花水煎液。

分离:取sbs/GUS提取液1.5mL、灯盏花水煎液10mL,加0.5%偏重亚硫酸钠,于45℃水浴分别酶解10、15、20h。测定水液和沉淀中野黄芩素的含量,计算水液中野黄芩素占比,结果分别为18.4%、13.4%、10.7%。表明酶解时间延长有利于野黄芩素的沉淀分离,酶解20h水液中损失较小,故酶解时间选择20 h。综上,由灯盏花制备野黄芩素工艺拟定为:取黄芩茎叶(粉碎过40目筛),加10倍水(第1次多加4倍)室温搅拌提取3次,每次15min,滤过,合并滤液,得sbs/GUS提取液;取灯盏花切段(黄芩茎叶10倍量),加10倍水(第1次多加5倍)煎煮提取2次,每次1h,滤过,合并滤液,得灯盏花水煎液;灯盏花水煎液与sbs/GUS提取液混匀,加入0.5%偏重亚硫酸钠,于45℃酶解20h,除去上清液,沉淀抽滤,减压干燥,即得野黄芩素粗提物。

纯化:取粗提物,按野黄芩素与80%乙醇料液比1∶150(m/V)加入80%乙醇加热回流30min,再加入相当于粗提物质量10%的活性 炭加热回流30min,趁热抽滤。滤液浓缩至有明显沉淀析出,静置过夜,滤过,得沉淀I;取滤液继续浓缩静置过夜,滤过,得沉淀II;合并沉淀I和II,减压干燥,即得高纯度野黄芩素提取物。按照上述纯化工艺进行试验,重复3次,结果见表。 野黄芩素粗提物经乙醇提取、活性炭脱色、浓缩结晶纯化后,野黄芩素含量由62%~64%提高至87%~89%。

纯化野黄芩素的实验结果

参考文献

[1]程雨婕,刘云华,黄志芳,等. 酶法制备野黄芩素的工艺研究[J]. 中药新药与临床药理,2024,35(2):274-279. DOI:10.19378/j.issn.1003-9783.2024.02.015.

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