简述
黄柏酮是从黄柏、白鲜皮等植物中提取出来的一种柠檬苦素类三萜化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化和抑制肿瘤等多种药理活性。常温常压下，该物质表现为白色结晶状粉末，不溶于水，易溶于氯仿、丙酮、冰醋酸等有机溶剂，难溶于乙醚，稍溶于乙醇。大量研究表明，黄柏酮可以用于治疗皮肤感染、消化系统感染、呼吸道感染以及某些肿瘤等疾病。此外，它还可以用作抗氧化剂，帮助抵抗自由基的损害和预防心血管疾病等慢性疾病的发生。总的来说，黄柏酮是一种具有广泛应用前景的天然药物成分。
含量测定
采用高效液相色谱法建立关黄柏叶中黄柏酮的含量测定方法（高效液相色谱法）主要内容如下：WondaSil C18 Superb色谱柱(150 mm×4.6 mm，5μm)，乙腈-0.1%醋酸水(V：V=49：51)为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为215 nm，柱温为30℃。结果，黄柏酮在1.68~52.74μg/mL范围内，线性关系良好(R2=0.9999)。供试品溶液在24 h内稳定性良好，方法的精密度高，平均加样回收率为102.2%，RSD为2.27%。关黄柏叶中黄柏酮的含量为1.604 mg/g[1]。
应用
黄柏酮在药物治疗领域应用广泛，不仅可用于防治溃疡性结肠炎[2]。还可用于制备治疗或预防铂类或氨基糖苷类药物或噪声引起的听力损失的药物。实验结果表明，黄柏酮对顺铂、氨基糖苷类药物或噪声诱导的小鼠听力损失具有保护作用，对顺铂、氨基糖苷类药物或噪声诱导的耳蜗毛细胞丢失具有改善作用。黄柏酮可有效用于顺铂、氨基糖苷类药物导致的药物性听力损失和噪声性听力损失的预防和治疗，具有开发成相应药物的应用前景[3]。
文献还报道了一种黄柏酮联合派姆单抗的药物组合物，通过动物实验，对组织进行免疫染色和蛋白组学分析，表明该组合物从白鲜皮中分离的三萜类化合物黄柏酮联合派姆单抗具有很好的抗胰腺癌活性，且具有良好的安全性，可作为活性化合物，用于制备治疗胰腺癌的药物[4]。
医药保健品领域则提供了一种黄柏酮的新的医药用途，即黄柏酮在制备治疗卒中后中枢性疼痛的药物和保健品中的用途。经过试验验证，黄柏酮可以明显降低小鼠丘脑出血后死亡率，并缓解丘脑出血引起的机械和温度刺激痛觉过敏[5]。
有关研究
炎症是机体对外界刺激的一种自身反应，适当的炎症反应可以修复受损组织，增强机体抗病机能，而过度的或持续的炎症反应均会引起组织损伤和诱发疾病，其本质就是机体内促炎/抗炎自稳失衡所致。巨噬细胞作为调控炎症反应的主要细胞，主要表现为活化后吞噬入侵的病原体并释放调节免疫应答的细胞因子。黄柏酮(OBA)是一种柠檬苦素类三萜化合物，主要分布于芸香科柑橘属植物以及能清热解毒燥湿的黄柏，白鲜皮等中药中。黄柏和白鲜皮在临床常用于炎症疾患，作为主要有效成分，黄柏酮是否具有抗炎作用迄今尚未见报道。因此，研究人员对其抗炎作用及分子机制展开了研究。
实验采用经典的细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞模型考察黄柏酮抗炎作用。Griess试剂法测定一氧化氮(NO)；酶联免疫法(ELISA)测定白介素-6(IL-6)，IL-1β和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)；实时定量PCR(RT-PCR)法分析一氧化氮合酶(iNOS)，IL-1β，IL-6和MCP-1 mRNA变化；采用报告基因的方法测定与炎症相关的核转录因子-kB(NF-kB)与活化蛋白-1(AP-1)激活;蛋白免疫印记(Western blot)法测定iNOS，p38分裂原活化蛋白激酶(p-p38/p38)，c-Jun氨基末端激酶(p-JNK/JNK)，细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2/ERK1/2)，丝裂原蛋白活化激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白表达；在计算机上使用Seaware靶点预测软件进行黄柏酮作用靶点分析，SEA (Similarity Ensemble Approach)算法比较目标分子与已知作用靶点的小分子相似性，MOE软件模拟配体和受体之间分子对接情况；细胞计数法考察黄柏酮对巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)趋化巨噬细胞的作用；酶促反应法测定重组MIF活性；采用"基因静默"的方法得到稳定的MIF (-) RAW264.7细胞。
结果显示，黄柏酮 (25，50，100μM)能降低iNOS，IL-6，IL-1β，MCP-1转录与表达，抑制AP-1激活，降低p38 MAPK磷酸化水平，增加MKP-1表达；靶点预测结果显示黄柏酮能对接到MIF (315t)活性口袋A链和C链之间的位置（如下图所示）。因此，聚焦于MIF，发现黄柏酮能明显抑制MIF所致的巨噬细胞趋化，并且在非细胞系中黄柏酮还能够直接抑制MIF酶活性。LPS刺激MIF (-) RAW264.7细胞，得到与黄柏酮处理活化RAW264.7细胞后相似的结果。以上结果说明：黄柏酮通过与MIF (315t)活性口袋A链和C链之间的位置对接抑制其功能，导致MKP-1表达增多，MKP-1再促p-p38 MAPK脱磷酸化，从而减少了AP-1下游相关促炎基因如iNOS，IL-6，IL-1β，MCP-1等的转录与表达，进而发挥抗炎作用[6]。
参考文献
[1]刘璇,陈剑锋,张司舵,等.高效液相色谱法测定关黄柏叶中黄柏酮的含量[J].广东化工, 2023, 50(15):165-166.
[2]窦薇,任改艳,孙阿宁,等.黄柏酮在制备防治溃疡性结肠炎的药物中的应用.2018.
[3]高下,黎奥,钱晓云,等.黄柏酮在制备治疗或预防铂类或氨基糖苷类药物或噪声引起的听力损失的药物中的应用:202310771287[P].
[4]桑春艳,杨军丽.黄柏酮联合派姆单抗在制备抗胰腺癌药物中的应用:202211705157[P].
[5]卜凡.黄柏酮在制备具有预防或治疗卒中后中枢性疼痛的药物中的应用:CN202410017012.9[P].
[6]刘芬.黄柏酮靶向抑制MIF抗炎作用研究[J].北京协和医学院, 2016.