概述
尼卡巴嗪(Nicarbazin)是一种全球公认的化学合成类抗球虫老药，是由等摩尔2-羟基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)，4,4'-二硝基二苯基脲(DNC)复合而成的氧化磷酸化解偶联剂，目前主要作饲料添加剂用于鸡球虫病的预防，具有高效，低毒，不影响免疫功能，耐药虫株产生慢的优点。尼卡巴嗪是通过抑制球虫的无性裂殖生殖而产生抗球虫作用，对球虫的活性峰在第二代裂殖体(即球虫生命周期的第4天)，抗球虫效果好。由于尼卡巴嗪影响母鸡繁殖性，对雏鸡有潜在的生长抑制效应，增强鸡热应激等不良作用，以及在禽肉，蛋中残留而危害人体健康，各国均制定了禽类产品中的尼卡巴嗪最高残留限量或规定不得在进出口禽类食品中检出[1-3]。尼卡巴嗪属均二苯酰脲类，常温常压下其性状为黄色粉末，不溶于水[4]。
制备方法
方法一
将对硝基苯胺，固体光气，溶剂投入反应釜中，在75～130℃条件下生成4,4'-二硝基二苯基脲，然后加入甲醛，乙酰丙酮，尿素，一种无机酸，在65～70℃反应11小时，用碱调pH值为中性，离心，干燥即可获得符合质量标准的尼卡巴嗪[5]。
方法二
以对硝基苯胺和三光气为原料合成了4,4'-二硝基二苯基脲(DNC)，副产物氯化氢气体用冷甲醇吸收，产生的溶液用于合成2-羟基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)。以尿素和乙酰丙酮为原料，在氯化氢甲醇溶液中合成了HDP。以DNC和HDP的甲醇溶液反应合成了抗球虫药尼卡巴嗪。对溶剂，反应温度和投料比等影响反应的因素进行了优化。结果表明，以二甲苯为溶剂，n(对硝基苯胺): n(三光气) =6:1时，在130℃下反应15h，DNC的收率可达94%；以氯化氢甲醇为溶剂，n(乙酰丙酮): n(尿素) =1.0:1.1，回流下反应5h，HDP的收率为93%以上；以甲醇为溶剂，n(DNC) : n(HDP)=1.0:1.1，室温反应5h，尼卡巴嗪的总收率可达93%。同时通过并联反应，缩短了生产周期，提高了产品质量的稳定性[6]。
分析检测
实验建立高效液相色谱法测定尼卡巴嗪的含量，采用WatersX—BridgeC18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱，乙腈-水(用磷酸调pH至3.0)为流动相，梯度洗脱，流速为1.0mL.min-1。检测波长0~5min为297nm，5min开始为350nm，柱温30℃，进样体积为20μL。2-羟基-4.6-二甲基嘧啶(HDP)的回归方程为：Y=23452x-456，相关系数r=0.99999，4,4’-二硝基均二苯脲(DNC)的回归方程为：Y=102388x+5296，相关系数r=0.9999，即HDP在0.29-29.12μg/mL范围内具有良好的线性，DNC在0.71~70.90μg/mL范围内具有良好的线性。该方法简便、准确、灵敏度高、重复性好，可以通过同时测定尼卡巴嗪中HDP和DNC来计算尼卡巴嗪的含量[7]。
此外，文献还报道了一种用于检测尼卡巴嗪的荧光偏振免疫分析方法。通过尼卡巴嗪半抗原与多种异硫氰酸荧光素偶联得到多种荧光标记物，得到最佳的荧光标记物和抗体组合，进而建立尼卡巴嗪残留荧光偏振免疫分析方法。该发明建立的尼卡巴嗪标准曲线，方法的IC50为28.3ng/mL，线性检测范围为10.3～78.1ng/mL，且与其他抗球虫药无明显交叉，特异性好。将其应用于鸡肉中尼卡巴嗪的检测，LOD为24.2μg/kg，回收率为74.2%～85.8%，变异系数为4.0%～8.6%。该方法的灵敏度，回收率及精密度达到检测的要求。此外，该方法操作简单，效率高，短时间即可完成检测，对于尼卡巴嗪在动物性食品中残留快速筛选检测以及在畜禽生产中的规范使用具有重要意义[8]。
应用
尼卡巴嗪是一种广谱，高效，性能稳定的饲料添加剂，用于防治鸡，火鸡等禽类球虫病，对已产生耐药性的球虫，仍有显著疗效[9]。此外，禽类药物技术领域还报道了一种高活性抗球虫尼卡巴嗪组合物，包括以下质量百分数的组分：尼卡巴嗪8%~40%，聚卡波非或其盐0.1%~8%，抗菌肽0.5%~10%，PQQ 0.2%~6%，余量为稀释剂。该发明的组合物可延长药物在肠道的滞留时间，同时，有助于尼卡巴嗪在肠道内分解成更多粒径超细的4,4'二硝基均二苯脲(DNC)晶体，更易作用于寄生于肠道内的球虫或被吸收入血，在高效解决球虫问题的同时，可辅助控制继发的梭菌性肠炎问题，通过对球虫和梭菌这两种养鸡中破坏肠道最重要的致病因素的控制，从而更有效维护家禽肠道健全[9]。
参考文献
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