4-氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶的合成及下游产物

4-氨基吡唑并 [3,4-d] 嘧啶是一种腺嘌呤类似物杂环化合物，米色至浅褐色粉末（高纯品可呈白色），无气味难溶于水，‌别名‌：吡唑并腺嘌呤、7-脱氮 -8-氮杂腺嘌呤、Pyrazoloadenine、依鲁替尼中间体等。主要作为医药中间体及抗癌药物研发砌块使用。

主要用途与活性

1生物活性‌：是‌RET 蛋白激酶抑制剂‌的前体/关键中间体，用于开发非小细胞肺癌靶向药；可抑制 BTK、CDK1/2、Src、RIPK1 等多种激酶；历史上曾研究其抗肿瘤及降胆固醇潜力（动物实验）。

2应用领域‌：主要用于合成抗癌药物（如伊鲁替尼类似物）、激酶抑制剂及核苷类似物库构建。

合成方法

1 将5-氨基-1H-吡唑-4-甲腈（4.31 g，39.96 mmol，1当量）与甲酰胺（15 mL，443 mmol，16当量）在微波反应管中混合。在180°C下用微波加热反应75分钟。待反应混合物冷却。通过真空过滤收集所得沉淀。用水彻底洗涤固体。将产物在40°C的真空烘箱中干燥过夜，得到4-氨基吡唑并 [3,4-d] 嘧啶。

2将市售的5-氨基-1H-吡唑-4-甲腈（2.0 g，18.5 mmol）与甲酰胺（10 mL）混合，在氮气氛围下加热至180°C过夜。将溶液冷却至室温，加入60 mL水，通过真空过滤收集所得沉淀4-氨基吡唑并 [3,4-d] 嘧啶。收率：(2.367 g, 95%)。

下游产物合成

8-氮杂-7-去氮-2′-脱氧腺苷，收率：77%。使用 K、Na-磷酸盐缓冲液（10 mM，pH 7.0），4-氨基吡唑并 [3,4-d] 嘧啶与 2'-脱氧鸟苷的摩尔比为 1.5:1.0， 每 1 mmol 碱使用 1000 单位大肠杆菌嘌呤核苷酸磷酸酶（反应中取约 0.10-0.15 mmol 碱溶于 10-15 mL 缓冲液），于 50 °C 反应 48-50 小时。过滤反应混合物。向滤液中加入硅胶（约 2 mL）。将混合物蒸干。用乙醇共蒸发该混合物。将吸附有产物的硅胶置于硅胶柱顶部（约50 mL）。用CHCl₃-MeOH洗脱产物。HPLC数据 [Kromasil C18，4.6 × 250 mm，5 μm；洗脱液为H₂O-MeOH-TFA，90:10:0.1；流速1 mL/min]。[1]

参考文献

[1] Stepchenko, V. A., Seela, F., Esipov, R. S., Miroshnikov, A. I., Sokolov, Y. A., & Mikhailopulo, I. A. (2012). Enzymatic synthesis of 2′-deoxy-β-D-ribonucleosides of 8-azapurines and 8-aza-7-deazapurines. Synlett, 23(10), 1541-1545.