N-芴甲氧羰基-甘氨酰-甘氨酸（简称 Fmoc-Gly-Gly-OH）是一种用于多肽合成的氨基酸衍生物，外观呈白色粉末状。
主要用途
N-芴甲氧羰基-甘氨酰-甘氨酸的核心作用是作为固相多肽合成中的关键中间体，广泛应用于多肽合成、药物开发和生物探针等领域。 其结构中的Fmoc基团可在碱性条件下脱除，使氨基参与后续肽键形成，从而实现多肽链的逐步延伸。
合成方法
在室温下，以0.5 ml/min的流速，将2至2.5 ml脑组织提取液加入IDA-Cu(II)色谱柱顶部，并加入FMOC衍生物和甘氨酰甘氨酸。用0.1M、pH 10.3的氨缓冲液使混合物达到平衡。弃去色谱柱的死体积（7 ml）。收集两个分馏液。用30 ml 0.1 M、pH 10.3的铵缓冲液洗脱分馏液I。用30 ml 1.5 M氨水洗脱分馏液II。使用由岛津LC6A系统控制器、配备10 μl进样环的Rheodyne 7125进样器、波长设定为260 nm的Pye Unicam紫外检测器以及岛津CR3A积分器组成的色谱系统对产物进行纯化得N-芴甲氧羰基-甘氨酰-甘氨酸。[1]
在配备滤片玻璃反应器的机械振荡器中进行肽的组装。使用预装有 Fmoc-Gly-OH 的王树脂（1 nmol/g，200-400 目）作为固相载体。将预装好的树脂（50 mg，装载量 0.89 nmol/g）在 DMF（0.5 mL）中膨胀 5 分钟。通过过滤除去多余的溶剂。用 20% 哌啶-DMF 溶液处理两次（分别 5 分钟和 15 分钟）以去除 Fmoc 保护基。用 DMF 洗涤树脂 5 次。采用 Fmoc 策略进行偶联反应，使用 TBTU/HOBt 作为活化试剂。通过通用偶联反应（60 分钟）引入每个 Fmoc-二肽，使用两倍过量的二肽、活化试剂以及三倍过量的 DIPEA，溶剂为 DMF（0.5 mL）。用 DMF 洗涤 5 次，用 CH₂Cl₂ 洗涤 2 次。在高真空下干燥树脂得N-芴甲氧羰基-甘氨酰-甘氨酸。
将N-(芴-9-甲氧羰基) D-丙氨酸（311 mg）和N-羟基琥珀酰亚胺（115 mg）溶解于15 mL无水二甲氧基乙烷中。将溶液冷却至4°C。向溶液中加入二环己基碳二亚胺（227 mg）。在 4 °C 下搅拌混合物 24 小时。过滤除去尿素沉淀。通过蒸发溶剂将滤液浓缩至干。收集所得的 Fmoc-D-Ala 的 N-羟基琥珀酰亚胺酯。在搅拌下，将2毫升丙酮和8毫升乙醇中溶解的Fmoc-D-Ala的N-羟基琥珀酰亚胺酯（204毫克）溶液加入到含有45毫克D-丙氨酸（0.5毫摩尔）和84毫克碳酸氢钠（1毫摩尔）的2毫升水溶液中。搅拌20小时后，蒸发掉有机溶剂。向混合物中再加入5毫升水。通过过滤除去不溶性杂质。用浓盐酸将滤液酸化。收集沉淀。用水洗涤沉淀数次。在真空下干燥沉淀得N-芴甲氧羰基-甘氨酰-甘氨酸。
参考文献
[1] Aubry, A. F., Caude, M., & Rosset, R. (1992). Separation and identification of dipeptides in a hydrolyzed brain extract. Chromatographia, 33(11), 533-538.