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987-78-0

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以2-(((((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(羟基)磷酰基)氧基)氧代磷酰基)氧基)-N,N,N-三甲基乙铵为原料，合成2-((((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(羟基)磷酰基)氧基)氧化磷酰基)氧基)-N,N,N-三甲基乙烷-1-铵钠盐(1:1)的一般步骤如下：将CMP（100mg，0.31mmol）在DMF（2mL）和三丁胺（150μL，0.62mmol）中的游离酸搅拌悬浮液于50℃加热10分钟，随后冷却至室温。加入CDI（250mg，1.55mmol）后，悬浮液在几分钟内变为澄清溶液。反应混合物在室温下无水条件下搅拌30分钟，随后用无水甲醇（100μL，2.48mmol）处理以水解过量的CDI。30分钟后，加入无水氯化锌（59mg，0.43mmol），随后加入磷酸胆碱溶液（0.77M无水DMF溶液，2mL，1.55mmol）。反应混合物在室温下搅拌24小时。溶剂在真空中蒸发后，通过阴离子交换色谱法纯化CDP-Cho 5。将残余物溶解于水中，用Sephadex DEAE A-25树脂离子交换柱色谱法纯化，采用0-0.5M碳酸氢铵线性梯度洗脱，随后在RP-18上进行色谱分离。通过将核苷酸溶液通过Dowex 50WX8柱，将三乙铵抗衡离子交换为钠离子。冷冻干燥后得到1-（β-D-呋喃核糖基）胞嘧啶-5'-二磷酸胆碱（钠盐），为白色固体（115mg，收率74%）。HPLC：tR = 8.8min（λmax 276nm）；1H NMR（400MHz，D2O）δ 7.86（d，1H，H6，J6-5 = 7.6Hz），6.04（d，1H，H5，J5-6 = 7.6Hz），5.92（d，1H，H10，J10-20 = 4.0Hz），4.31（sl，2H，CH2-O），4.28-4.08（m，5H，H2O H30H40H50和H50b），3.60（t，2H，CH2-N，J = 4.2Hz），3.14（s，9H，CH3）；13C NMR（101MHz，D2O）δ 166.2（s，C4），157.7（s，C2），141.4（s，C6），96.6（s，C5），89.3（s，C10），82.6（d，C40，JC-P = 8.9Hz），74.1（s，C20），69.3（s，C30），65.9（s，CH2N），64.7（d，C50，JC-P = 5.1Hz），59.9（s，CH2O），53.9（s，CH3）；31P NMR（162MHz，D2O）δ 11.35（d，2Jab = 21.4Hz），12.14（d，2Jab = 21.4Hz）；HRMS（ESI）m/z：[M + H]+ C14H26N4O11NaP2计算值511.0971，实测值511.0973。

参考文献：

[1] Tetrahedron Letters, 2014, vol. 55, # 38, p. 5306 - 5310

Citicoline是细胞膜磷脂质中的主要成分，是由核糖、焦磷酸酯、胞嘧啶和胆碱组成的复杂的有机分子。Citicoline具有水溶性，其口服生物利用度大于90%。Citicoline对hCMEC/D3没有促有丝分裂和趋化作用。然而，它能显著地增强伤口愈合、球体发芽，强烈诱导基底膜基质中内皮管状结构的形成。Citicoline能够诱导磷酸化ERK1/2的表达。它能保护hCMEC/D3免于细胞损伤/凋亡。Citicoline通过p-ERK1/2和IRS-1相关通路诱导血管新生、改善人脑微血管内皮细胞的生存。