背景技术
山萸肉是山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉，是四十种极为常用的名贵中药之一。现代研究表明，环烯醚萜苷类成分为山萸肉的重要活性物质，具有抗炎、保肝、免疫抑制等活性。目前的药理学研究已经初步揭示了其中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷等成分的活性，而其它环烯醚萜苷类成分的药理作用目前尚不明确。文献研究表明莫诺苷具有改善糖尿病并发症和减轻脑缺血损伤等作用，具有抗炎、抗氧化、和神经保护等活性。7-O-乙基莫诺苷为山萸肉中的一种环稀醚砲苷类成分(含量约为0.05〜0.06mg/g)，含有莫诺苷骨架结构，然而其是否具有莫诺苷类似的药理活性还未见系统的研究。由于7-O-乙基莫诺苷在山萸肉饮片中含量较少，从饮片中分离、纯化不能较好地满足体内外药理活性研究的需要。因此，本发明研发7-O-乙基莫诺苷的转化合成的方法，在此基础上对7-O-乙基莫诺苷的体内外抗炎作用进行了系统的研究。
发明内容
发明目的:本发明的目的是提供一种7-O-乙基莫诺苷的新制备方法，并且本发明考察7-O-乙基莫诺苷的体内外抗炎作用。
技术方案:为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为:
7-O-乙基莫诺苷的制备方法，包括以下步骤:
(1)溶解:取山茱萸环烯醚萜总苷为原料，加原料重量10〜20倍体积的乙醇，超声溶解；
(2)调pH:超声溶解后，调节溶液的pH值至1〜3或者加入乙酰化试剂；
(3)加热:加热回流提取10〜20h，过滤得提取液，浓缩得浸膏；
(4)纯化、结晶:将浸膏溶于乙酸乙酯，过滤，除去不溶物，浓缩，浓缩液加入二氯甲烷，放置结晶，重复结晶1〜3次，减压干燥即得7-O-乙基莫诺苷。
作为优选方案，以上所述的7-O-乙基莫诺苷的制备方法，山茱萸环烯醚萜总苷是以山茱萸为原料，采用水提取方法制备得到山茱萸环烯醚萜总苷。作为优选方案，山茱萸环烯醚萜总苷中含有重量百分比20〜40%莫诺苷和重量百分比10〜20%马钱苷。
作为更加优选方案，所述的7-O-乙基莫诺苷的制备方法，山茱萸环烯醚萜总苷中含有重量百分比40%莫诺苷和重量百分比20%马钱苷。
作为优选方案，以上所述的7-O-乙基莫诺苷的制备方法，步骤(1)中乙醇为无水醇；超声频率为20〜60kHz，功率为30kW。本发明通过大量实验筛选得到超声溶解的超声频率和功率，可大大提高反应物的溶解率，保证反应转化率。[0013]作为优选方案，以上所述的7-O-乙基莫诺苷的制备方法，步骤(2)中的pH值调节剂为磷酸、盐酸、硫酸或硝酸中的一种。
本发明通过大量实验筛选，调节反应物pH值为1〜3,可提高合成速率，提高反应得率，可使7-O-乙基莫诺苷的转化率在93%以上。
作为优选方案，以上所述的7-O-乙基莫诺苷的制备方法，步骤(3)中在80〜100°C加热回流提取16h，本发明通过大量实验筛选不同的反应温度和反应时间，对比实验结果表明，在80〜100°C加热回流提取16h可以使7-O-乙基莫诺苷的合成率最高，杂质少，得率高。
作为优选方案，以上所述的7-O-乙基莫诺苷的制备方法，纯化步骤，本发明通过大量实验筛选不同的溶剂，实验结果表明采用乙酸乙酯溶解，可以有效去除不溶物，并且采用优选的二氯甲烷溶剂作为重结晶溶剂，可以得到纯度98%以上的7-O-乙基莫诺苷。本发明不需要经过柱层析复杂的纯化步骤，纯化速度更快，工作效率更高，成本低，更有利于工业化生产。
本发明通过体内外抗炎实验，结果表明7-O-乙基莫诺苷体内和体外均具有很好的抗炎效果。
有益效果:本发明提供的7-O-乙基莫诺苷的制备方法和现有技术相比具有以下优占.本发明通过大量实验筛选出的7-O-乙基莫诺苷制备工艺，包括溶解方法，调节优选的pH值，加热温度，加热时间反应参数，并且优选出的纯化方法，整个反应工艺设计合理，可操作性强，7-O-乙基莫诺苷合成率高，杂质少，纯度高，成本低，可实现工业化生产。
本发明通过体内外抗炎实验筛选，首次证明7-O-乙基莫诺苷体内和体外均具有很好的抗炎效果，可以用于制备成抗炎药物。
具体实施方式
7-O-乙基莫诺苷的制备方法，包括以下步骤:
(1)溶解:称取山茱萸环烯醚萜总苷(含有莫诺苷40%，马钱苷20%)lkg，加入10L无水乙醇，常温条件下搅拌使之分散均匀；
(2)调pH值:加入适量的稀磷酸调节pH=3;
(3)加热反应:在80°C回流16h;过滤得提取液，浓缩得浸膏；
(4)纯化、结晶:浸膏加入乙酸乙酯溶解，过滤出去不溶物，滤液浓缩至小体积，向浓缩液中加入二氯甲烷搅匀至有沉淀析出，放置结晶，结晶物再用乙酸乙酯溶解，加入二氯甲烷重结晶，过滤减压干燥得化合物7-O-乙基莫诺苷产物365g，转化率93%JS提示所得化合物分子量:434g/mol。